目錄:北京索萊寶科技有限公司>>細胞培養(yǎng)相關(guān)>>胰蛋白酶消化液>> T1320T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500ml |
|---|---|---|---|
| 貨號 | T1320 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
| 主要用途 | 液體,2.5g 豬胰蛋白酶和0.2g EDTA溶于1升PBS。不含鈣和鎂,含酚紅 |
T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液
在組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散（將組織塊制備成單個細胞懸液）和傳代細胞培養(yǎng)中,，貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液,。常用的消化液為胰蛋白酶,，EDTA,，其功能主要是使細胞間的蛋白質(zhì)水解,，使組織或細胞分散成單個細胞,，制成細胞懸液用于進一步的實驗,。
胰蛋白酶（Trypsin）簡稱胰酶，是由動物豬胰臟中提取的一種蛋白酶制劑,。胰蛋白酶作用于與賴氨酸或精氨酸相連接的肽健,，除去細胞間粘蛋白及糖蛋白，影響細胞骨架,，打開細胞-細胞,，細胞-基質(zhì)之間的連接從而使細胞從培養(yǎng)板上脫落下來并使細胞分散成單個細胞。胰蛋白酶液濃度越高,，作用越強,，但超過一定限度會損傷細胞。細胞消化用胰蛋白酶常用的工作濃度為0.25％,，pH為7.2-7.4之間,，用濾器過濾除菌。EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子,，以便保持抑制胰蛋白酶的活性,。注意EDTA不能被血清中和，使用后培養(yǎng)瓶要*清洗,，否則再培養(yǎng)時細胞容易脫壁,。
胰蛋白酶液消化時間：2-10分鐘。用含血清培養(yǎng)液終止其對細胞的消化作用,。
使用說明：1,、貼壁細胞的消化：貼壁細胞在培養(yǎng)瓶中長成致密單層后，繼續(xù)生長的空間不足,，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成份也消耗較多,，同時代謝廢物也有較多堆積,，需要分瓶培養(yǎng)，擴增,、傳代,。對于懸浮生長細胞和貼壁不太緊的細胞如SP2/0，293等,，可直接吹散后分瓶,；而對于貼壁較緊的細胞如Hela，HepG2,，CHO等,，則需要以細胞消化液消化后，才能脫落和分散,，擴瓶,。一般操作過程為（以下操作均必須嚴格按無菌操作的要求進行）：
（1）將長成致密單層細胞的細胞瓶中原來的培養(yǎng)液棄去；
（2）加入0.25％胰酶溶液,，視細胞瓶的大小加入體積為0.5ml或更多（依培養(yǎng)器皿的大小而定）,，以使充分浸潤；
（3）一般消化時間約為13分鐘,，肉眼觀察瓶底由半透明（細胞單層連接成片）轉(zhuǎn)為點狀透明（出現(xiàn)細小空隙）時,，棄去細胞消化液，并加入適量的*培養(yǎng)液終止消化,，吹打分散,；
（4）視實驗目的分入多瓶繼續(xù)培養(yǎng)，一般比例為一傳二到一傳四的,。
2,、組織的消化：不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜,。
注意事項：1．由于組織或細胞性質(zhì)不同,，實驗人員應依據(jù)具體情況，確定佳消化時間,；消化細胞時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁和生長狀況；
2,、分裝胰蛋白酶-EDTA消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染,；
3、胰蛋白酶-EDTA消化液建議-20℃保存,，切忌反復凍融,，
4、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套進行試驗操作,。
相關(guān)文獻：
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu,Yubing Liang,Yong Xiao,Jing Lv,Ruicong Guan,Fei Xiao,Yubo Xie,and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699
相關(guān)產(chǎn)品：
T1300 胰蛋白酶－EDTA消化液(0.25%)不含酚紅 100ml 90.00
T1320 胰蛋白酶－EDTA消化液(0.25%)含酚紅 100ml 90.00
T1350 胰蛋白酶消化液(0.25%)不含酚紅 100ml 90.00
P1400 青鏈霉素混合液（雙抗）(100×) 100ml 90.00
P8370 細胞分離液（） 100ml 600.00
P8610 人外周血淋巴細胞分離液 200ml 150.00
P8670 人外周血白細胞分離液 200ml 480.00
(各種淋巴細胞分離液均有貨,，可直接咨詢)
F0020 無菌去離子水(For Cell Culture ) 100ml/500ml 40/70
H1090 1M Hepes溶液(Free Acid，無菌) 100ml/500ml240/900
T1320 胰蛋白酶-EDTA消化液
12
化工儀器網(wǎng)