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A． 本分離液是敏光型的,，在運(yùn)輸和貯藏過程中應(yīng)在 18℃-25℃避光保存,，啟封后置 4

℃保存避免微生物污染。另外,，本品為真空包裝,，未啟封前置于 10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶，

影響分離效果,。

B． 待分離的血液,、組織及細(xì)胞要求新鮮，避免冷凍和冷藏,。分離液和所分離樣本一

定在20℃水浴箱中復(fù)溫20分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在20℃±2℃時(shí)分離效果,，

且所有操作過程一定要在無菌條件下進(jìn)行。

C． 由于各品牌離心機(jī)的性能不同,，國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,，可能影響

分離效果，用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),，調(diào)節(jié)離心的時(shí)間,，摸索佳的分離條件（具體分離條件

各實(shí)驗(yàn)室自定）。

D． 使用無靜電反應(yīng)的離心管,，推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管,。

E． 優(yōu)抗凝劑選擇：EDTA、枸櫞酸,、肝素,。應(yīng)注意在血液稀釋過程中應(yīng)去除抗凝劑

體積。

F． 分離過程中所用其他試劑如：羥乙已基淀粉 550,、全血及組織稀釋液,、細(xì)胞洗滌液及紅細(xì)

胞裂解液等以我公司產(chǎn)品為優(yōu)選擇，本公司相關(guān)系列產(chǎn)品無菌,、無病毒,、無支原體,、低內(nèi)

毒素水平且無細(xì)胞毒性，所獲得的細(xì)胞可保持完好的生物活性和完整的細(xì)胞形態(tài),。

4. 應(yīng). 用

適用于從動(dòng)物血液或臟器組織中分離單核細(xì)胞,。

5.. . . 產(chǎn)品性能指標(biāo)

pH 7.0-7.5

滲透壓 280-340mOsmol/kg

內(nèi)毒素 ≤0.5...EU/ml

無菌 直接接種培養(yǎng) 14 天后培養(yǎng)基澄清

澄明度及不溶性顆粒物 每 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 20 粒以下，,，,，

含 25μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 5 粒以下

6.

7. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備 7. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

A． 試劑

單核細(xì)胞分離液試劑盒所含試劑、組織勻漿液,、羥乙已基淀粉 550,、胎牛血清

B． 器材

玻璃離心管、玻璃滴管

水平轉(zhuǎn)子離心機(jī),、無菌工作臺

8. 各種動(dòng)物 8. 各種動(dòng)物單核細(xì)胞分離液試劑盒使用方法說明及圖例

A. 在 10ml 或 15ml 玻璃離心管中依次小心加入 A,、D 兩種液體各 2ml,制成梯度界面（各液面分層一定要清晰）；

B． 取 1ml新鮮抗凝血按1：1比例與全血及組織稀釋液混勻并小心疊加于D液之液面上,；或?qū)⒔M織單細(xì)胞懸液（細(xì)胞濃度為2×108

-1×109個(gè)/ml,，制備方法詳見“10.組織單細(xì)胞懸液的制備方法”）疊加于D液之液面上；

C. 以400g（約1500轉(zhuǎn)/分）離心15分鐘(半徑15cm水平轉(zhuǎn)子),；

此時(shí)離心管中由上下細(xì)胞分為六層,。*層；為血漿（稀釋液）層,。第二層,；；,；為,；單核

細(xì)胞層。,。,。第三層；為透明 D 液層,。第四層,；為淋巴細(xì)胞層。第五層,；為透明 A 液層,。第六層；

為極少量紅細(xì)胞層,。收集第二層單核細(xì)胞放入含 4-5ml 細(xì)胞洗滌液的試管中,，充分混勻后，

以 500g（約 1800 轉(zhuǎn)/分）離心 20 分鐘,，棄去上清留沉淀細(xì)胞重新懸起,。重復(fù)洗滌 2 次即得所需單核細(xì)胞。

注：：A. 提取率約為 80%,。