奧林巴斯CX33顯微鏡明場與相差觀察酵母,、細菌的方法及要點

奧林巴斯CX33顯微鏡是一款正置生物顯微鏡，支持明場（Brightfield, BF）和相差（Phase Contrast, PC）兩種觀察模式,，適用于酵母,、細菌等微生物的形態(tài)學研究。以下從觀察原理,、操作步驟,、注意事項等方面展開分析：

一、明場觀察酵母與細菌

1. 原理
明場觀察通過透射光直接成像,，適合觀察染色或高對比度樣本（如細菌涂片染色,、酵母細胞固定后染色）。酵母細胞較大（約5-10μm）,，細菌較?。s0.5-5μm）,，明場下需高倍物鏡（如40X、100X）和良好調(diào)焦才能清晰觀察,。

2. 操作步驟

• 樣本制備：

• 細菌：取菌液涂片,，熱固定后染色（如革蘭氏染色），滴加香柏油,。

• 酵母：取酵母液涂片,，固定后染色（如美藍染色），滴加香柏油,。

• 顯微鏡設置：

• 切換至明場模式,，選擇10X目鏡和40X或100X物鏡。

• 調(diào)節(jié)光源亮度至適中,，粗調(diào)焦后微調(diào)至清晰,。

3. 觀察要點

• 細菌：觀察形態(tài)（桿狀、球狀）,、排列方式（鏈狀,、簇狀）及染色特性（革蘭氏陽性/陰性）。

• 酵母：觀察細胞形態(tài)（橢圓形,、圓形）,、出芽生殖及細胞內(nèi)含物（如淀粉粒）。

4. 優(yōu)缺點

• 優(yōu)點：操作簡單,，適合染色樣本,。

• 缺點：未染色樣本對比度低，細菌觀察困難,。

二,、相差觀察酵母與細菌

1. 原理
相差觀察通過物鏡和聚光鏡中的相差環(huán)（Phase Ring）將光程差轉化為振幅差，增強未染色透明樣本的對比度,。適合觀察活細胞或未染色樣本（如酵母培養(yǎng)液,、細菌懸液）。

2. 操作步驟

• 樣本制備：

• 細菌：取新鮮菌液,，滴加至載玻片,，蓋上蓋玻片（避免氣泡）。

• 酵母：取酵母培養(yǎng)液,，滴加至載玻片,，蓋上蓋玻片。

• 顯微鏡設置：

• 切換至相差模式,，安裝相差物鏡（如10X,、40X）和相差聚光鏡。

• 調(diào)節(jié)光源亮度至適中,，粗調(diào)焦后微調(diào)至清晰,。

3. 觀察要點

• 細菌：觀察運動性,、形態(tài)（如弧菌的彎曲狀）及細胞內(nèi)結構（如核區(qū)）。

• 酵母：觀察出芽生殖,、假菌絲形成及細胞內(nèi)顆粒（如肝糖粒）,。

4. 優(yōu)缺點

• 優(yōu)點：無需染色，可觀察活細胞動態(tài),。

• 缺點：背景較亮,，需調(diào)節(jié)光源亮度；高倍物鏡下相差環(huán)易偏移,，需重新對焦,。

三、奧林巴斯CX33顯微鏡的操作建議

1. 物鏡選擇：

• 明場觀察：建議使用40X或100X油鏡（需滴加香柏油）,。

• 相差觀察：建議使用10X或40X相差物鏡（無需油鏡）,。

2. 光源調(diào)節(jié)：

• 明場觀察：光源亮度調(diào)至中等，避免過亮導致染色樣本褪色,。

• 相差觀察：光源亮度調(diào)至較低,，增強對比度。

3. 調(diào)焦技巧：

• 相差觀察時,，需先在低倍（10X）下找到細胞,，再切換至高倍（40X）。

• 高倍物鏡下,，微調(diào)焦距時需緩慢旋轉,，避免細胞移出視野。

四,、常見問題及解決方案

五、總結

• 明場觀察：適合染色樣本,，操作簡單,，但未染色樣本對比度低。

• 相差觀察：適合未染色或活細胞樣本,，可增強對比度,，但需調(diào)節(jié)光源和相差環(huán),。

• 奧林巴斯CX33優(yōu)勢：支持明場與相差雙模式，操作便捷,，適合微生物形態(tài)學研究,。

通過合理選擇觀察模式和優(yōu)化操作步驟，可高效利用CX33顯微鏡觀察酵母與細菌的形態(tài)特征,。