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為什么熒光顯微鏡能觀察到熒光,，用LUYOR-3415RG觀測(cè)看不到,？
點(diǎn)擊次數(shù)：995 發(fā)布時(shí)間：2024-1-10
1.為什么熒光顯微鏡能觀察到熒光,，用LUYOR-3415RG觀測(cè)看不到？
因?yàn)橛行┲踩氲?span style="font-weight: bolder;">熒光蛋白不是整體表達(dá),，只是局部表達(dá),，表達(dá)的面積太小，人的肉眼無(wú)法識(shí)別,，而熒光顯微鏡是在放大幾十倍甚至上百倍觀察的效果,。
2.為什么按照LUYOR-3415說(shuō)明書(shū)操作卻看不到熒光的表達(dá)
原因是GFP激發(fā)光源沒(méi)有選擇正確，比如載體標(biāo)注的熒光蛋白應(yīng)該在488nm下激發(fā)出熒光,，但是卻選擇了540nm或者365nm的激發(fā)光源去激發(fā)熒光蛋白,，這種情況是看不到熒光蛋白的?？梢愿鶕?jù)LUYOR-3415 GFP激發(fā)光源介紹或者聯(lián)系客服小姐姐進(jìn)行咨詢(xún)?cè)龠x擇,。
3.為什么波段選擇是正確的還看不到熒光表達(dá)？
除了表達(dá)量少以外,，很有可能是實(shí)驗(yàn)的操作失誤,，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，因此看不到熒光,，可以選擇其他的陽(yáng)性質(zhì)粒進(jìn)行檢測(cè)儀器效果,。
4.為什么說(shuō)載體表達(dá)量低會(huì)導(dǎo)致看不到熒光蛋白？是不是表達(dá)量低的熒光蛋白都會(huì)看不見(jiàn)熒光,？
大家都知道肉眼的可視范圍是有限的,，比如只能看見(jiàn)籃球大小的物體，這時(shí)我們的載體表達(dá)量只有乒乓球大小就會(huì)導(dǎo)致看不見(jiàn),。并不是的表達(dá)量低都看不見(jiàn)熒光表達(dá),，只有低于人眼可視范圍的表達(dá)量才會(huì)導(dǎo)致看不見(jiàn)熒光的表達(dá)。這時(shí)可以借助普通的顯微鏡加上LUYOR-3415組合成熒光顯微鏡進(jìn)行觀察,。
5.LUYOR-3415RG如何切換光源,？
切換光源可在儀器頭部后方圓形按鈕處，輕輕按下按鈕即可輕松切換光源
6.植入到葉片的熒光蛋白為什么無(wú)法觀察到,？
因剛剛植入進(jìn)去不久,，表達(dá)位置太小，肉眼無(wú)法識(shí)別,。特別是在組培繁殖研究經(jīng)常遇到此問(wèn)題,。
7.用LUYOR-3415熒光蛋白觀測(cè)鏡無(wú)法分選含有GFP的種子
因?yàn)橐话惴N子表皮都有堅(jiān)硬的外殼，很多種子外殼上沒(méi)有表達(dá)GFP,，隔著外殼很難去分選種子,。
8.為什么老鼠早期可以看到熒光蛋白后期就很難看得到,？
剛出生的轉(zhuǎn)基因老鼠皮膚比較薄，毛發(fā)少,，很容易觀察到GFP,在生長(zhǎng)一段時(shí)間在表皮就很難看得到,。
9.觀察到的GFP效果如何拍照,？
如果用單反相機(jī)拍照,，請(qǐng)購(gòu)買(mǎi)專(zhuān)用的拍照濾鏡，把相機(jī)調(diào)試到合適的拍照模式（不同品牌的相機(jī)拍照模式不一樣）,，我公司提供62mm的單反相機(jī)專(zhuān)用拍照濾鏡,，可以單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)。
10.購(gòu)買(mǎi)的62mm相機(jī)濾鏡和照相機(jī)不配套怎么辦,？
請(qǐng)先識(shí)別自己相機(jī)鏡頭尺寸,，正視相機(jī)前端，上面一般會(huì)標(biāo)識(shí)XXmm,，例如：58mm,，67mm等，如果是58mm的鏡頭,，請(qǐng)購(gòu)買(mǎi)62轉(zhuǎn)58mm的轉(zhuǎn)換卡,，通過(guò)轉(zhuǎn)換卡可以將62mm的濾鏡安裝到58mm鏡頭上。我公司提供部分常規(guī)尺寸的轉(zhuǎn)換卡,，常規(guī)的轉(zhuǎn)換卡也可以向我公司技術(shù)人員免費(fèi)索取,。
11. 路陽(yáng)的熒光蛋白激發(fā)光源有什么優(yōu)點(diǎn)？
Luyor-3415采用了雙通道構(gòu)造,，一臺(tái)即可實(shí)現(xiàn)多種熒光蛋白的觀察,，比如：GFP,RFP,YFP,CFP等，且光源照射面積廣激發(fā)面積大,，2x6顆大燈柱,，激發(fā)出的熒光明亮，容易觀察且清晰,。
12.用于種子熒光蛋白篩選,，用哪一個(gè)型號(hào)比較好？
如果長(zhǎng)時(shí)間用于種子篩選,，建議購(gòu)買(mǎi)LUYOR-3415RG,，這款可以用交流適配器供電也可用鋰電池供電，可選配支架進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間工作,。
13.路陽(yáng)的熒光蛋白觀測(cè)鏡都有哪些用戶(hù),？
中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)、中山大學(xué),、南京農(nóng)業(yè)大學(xué),、華中農(nóng)業(yè)大學(xué),，中國(guó)農(nóng)科院、中科院遺傳所等,，目前有100多家科研單位在使用,。
14.LUYOR產(chǎn)品可以試用嗎？
luyor熒光蛋白觀測(cè)鏡可以試用,，試用產(chǎn)品為友情提供,，為了讓更多需要篩選的實(shí)驗(yàn)室研究人員了解到它，得到使用,，希望大家多多愛(ài)護(hù),。
15.為什么別的廠(chǎng)家的熒光蛋白觀察眼鏡和luyor的激發(fā)光源不匹配？
我們的觀察眼鏡和激發(fā)光源是經(jīng)過(guò)我們工程師調(diào)配好的,，不僅能夠阻隔掉激發(fā)光,，同時(shí)又能保證發(fā)射的熒光能夠更多的觀察到。
16.觀察眼鏡可以多買(mǎi)嗎,？
因我們一種光源標(biāo)配是一副眼鏡,，需要多配觀察眼鏡的請(qǐng)直接聯(lián)系我們銷(xiāo)售和當(dāng)?shù)卮砩藤?gòu)買(mǎi)。
17.如果需要長(zhǎng)時(shí)間使用激發(fā)光源進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的操作,，是不是需要一直用手舉著儀器,？還是有什么解決方法？
可以選取3415專(zhuān)用支架,，支架為可調(diào)支架,，如果長(zhǎng)時(shí)間用燈的話(huà)，可調(diào)支架可以解放雙手,。
18.產(chǎn)品保修多久,？
我們主機(jī)是免費(fèi)保修3年，充電電池組免費(fèi)保修1年,。
若有其他問(wèn)題需要咨詢(xún),，可掃描下方二維碼聯(lián)系上海路陽(yáng)儀器有限公司客服咨詢(xún)。
多種應(yīng)用
由于GFP及其易用性,，GFP等熒光蛋白已成為分子生物學(xué)的主流,。科學(xué)家可以很容易地利用含有GFP的質(zhì)粒作為一種手段,，達(dá)到許多功能目的,，以下是一些常用的用途，但是目前還有許多其他的用途,，并且新的GFP技術(shù)正在不斷發(fā)展,！
融合標(biāo)記：GFP是最常見(jiàn)的用途之一，它可以與蛋白質(zhì)的N-或C-末端融合,，這使科學(xué)家能夠可視化基因表達(dá)的時(shí)間和地點(diǎn),。
轉(zhuǎn)錄報(bào)告員：將GFP置于感興趣的啟動(dòng)子的控制下,，可以用來(lái)有效地監(jiān)測(cè)特定細(xì)胞類(lèi)型中啟動(dòng)子的基因表達(dá)。這種轉(zhuǎn)錄報(bào)告是GFP最早的應(yīng)用之一,。
F?rster共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：這是用來(lái)研究?jī)蓚€(gè)蛋白質(zhì)之間的相互作用,，或在兩個(gè)蛋白質(zhì)域之間發(fā)生構(gòu)象變化的相互作用。典型地,，使用了兩種具有重疊激發(fā)/發(fā)射光譜的熒光蛋白,；融合到每個(gè)正在測(cè)試的蛋白質(zhì)或域的一個(gè)。在這里找到微動(dòng)質(zhì)粒,。
分裂EGFP：作為一種替代fet的方法,，拆分EGFP也被用來(lái)研究蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用。在這種情況下,，EGFP的兩部分融合到感興趣的蛋白質(zhì)中，當(dāng)它們接近時(shí),，EGFP的兩部分經(jīng)歷折疊,、成熟和熒光。
生物傳感器：采用FRET,、鈣調(diào)蛋白等多種策略,，設(shè)計(jì)了一系列基于GFP的熒光生物傳感器，用于檢測(cè)各種細(xì)胞內(nèi)條件,，包括離子（如Ca2+）濃度和pH等,。
光遺傳學(xué)：科學(xué)家可以利用光來(lái)檢測(cè)、測(cè)量和控制分子信號(hào),、細(xì)胞和細(xì)胞群,，以了解它們的活動(dòng)，并可視化改變對(duì)這種活動(dòng)的影響,。了解更多關(guān)于光遺傳學(xué)的開(kāi)放式光遺傳學(xué),，并在Addgene找到光致執(zhí)行器和傳感器。
細(xì)胞標(biāo)記/選擇：表達(dá)結(jié)構(gòu)如質(zhì)粒通常包括GFP作為標(biāo)記,，以幫助識(shí)別哪些細(xì)胞成功地獲得了質(zhì)粒,。這可以作為選擇抗生素的替代品。這種類(lèi)型的質(zhì)?？赡茉诟信d趣基因的附加啟動(dòng)子的控制下,，或與感興趣基因相同的轉(zhuǎn)錄子表達(dá)GFP，但在內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)（IRES）之后,。