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      布魯頓激酶（BTK）是 BCR 通路的關(guān)鍵酶之一,。BCR 信號(hào)啟動(dòng)后,，BTK 磷酸 化并激活磷脂酶 Cγ2 （PLCγ2），進(jìn)而激活 NF-κB,。BTK 突變最初是在 x 連鎖無(wú)丙種球蛋 白血癥（XLA）患者中發(fā)現(xiàn)的,。BTK 在 CLL、MCL,、DLBCL 和其他類(lèi)型淋巴瘤中的進(jìn)一 步研究使其成為治療癌癥的有利靶點(diǎn),。此外，BTK 已被證明在 toll 樣受體介導(dǎo)的感染因子 識(shí)別和 Fc 受體信號(hào)傳導(dǎo)中起作用,。其中,，F(xiàn)c 受體信號(hào)在 BTK 信號(hào)傳導(dǎo)中尤為重要,。肥大 細(xì)胞、嗜堿性細(xì)胞,、單核細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞在炎癥和過(guò)敏反應(yīng)中發(fā)揮重要作用， 這些炎癥和過(guò)敏反應(yīng)是由高親和力 IgE 受體（FcεRI）交聯(lián)引起的,，激活細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路,， 導(dǎo)致脫顆粒和釋放組胺和其他促炎細(xì)胞因子。因此,，自身免疫條件下的組成型 BTK 激活導(dǎo) 致 FcεRI 的激活,。除此之外，免疫細(xì)胞如巨噬細(xì)胞上的 Fcγ受體（FcγR）也在腫瘤特異性 抗體介導(dǎo)的涉及 BTK 的免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用,。BTK 還被發(fā)現(xiàn)是 NLRP3 炎性體的直接 調(diào)節(jié)劑,。

      Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell 藥靶細(xì)胞，通過(guò)基因編輯的方式 將 BTK 的 481 位氨基酸半（C）突變?yōu)椤?/span>
 

Figure 1. Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell細(xì)胞的構(gòu)建原理圖

Figure 2. Sanger of  Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell.


2. DdPCR of  Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell

Figure 3. A： BTK WT Parental Cell,；B：Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell,。通道1 藍(lán)色微滴代表BTK C481S 突變陽(yáng)性，通道2 綠色微滴代表該位點(diǎn)為陰性野生型


3. Anti-proliferation assay

Figure 4. Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell-CTG 驗(yàn)證結(jié)果.