TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase細胞株 TPR-MET Y1203H/BaF3 kinase細胞株 I. Background | |
| 激酶(RTKs)是跨膜蛋白，在信號通路的啟動和調節(jié)中起重要作用,。大多數(shù) RTK 在細胞外配體結合時被激活,，促進細胞內磷酸化的傳遞,，從而驅動信號傳導。 MET 是一種受體激酶(RTK),，參與發(fā)育和傷口修復的信號通路,。MET 的激活依 賴于配體與細胞外受體的結合，從而促進二聚化,、細胞內磷酸化和相關信號蛋白的募集,。 c-MET 是肝細胞生長因子(HGF)激酶受體，MET 與 HGF 結合后,，發(fā)生自身磷酸化并 激活下游 PI3K/AKT,、RAS-MAPK、β-catenin 信號通路等多條信號通路,，從而發(fā)揮其促細 胞增殖,、細胞生長、細胞遷移,、侵襲血管及血管生成等效應,，在組織正常發(fā)育和腫瘤進展 中發(fā)揮關鍵作用。HGF/MET 通路異常與腫瘤的發(fā)生和轉移相關并誘導耐藥性的產生,，包 括 MET 基因重排,、基因突變、基因擴增和過表達,。 TPR-MET 重排是由 1 號染色體上的 TPR(易位啟動子區(qū))位點與染色體上的 MET 位點 衍生的序列的 5 '區(qū)域融合引起的,。融合分子 TPR-MET 包含 cMET 原癌基因的激酶 結構域，TPR 序列由組成啟動子和開放閱讀框組成,。它不需要依賴 HGF 的刺激下其激酶活 性持續(xù)很高,，并且本身的呈現(xiàn)被磷酸化狀態(tài)，從而引起 MET 信號通路的異常激活 和細胞增殖,、運動及血管和其他腫瘤微環(huán)境狀態(tài)的改變,，最終成為腫瘤發(fā)生和進展的驅動 因素,。 致癌突變的激活也可以發(fā)生在 MET 的其他結構域,，包括激酶結構域(TKD)，導 致與配體無關的受體磷酸化和信號傳導,。在約 13-20%的Ⅰ型乳頭狀腎細胞癌(pRCC)中發(fā) 現(xiàn) MET TKD 的激活遺傳性或散發(fā)性點突變,，并通過影響激活環(huán)的構象、促進激酶結構域 磷酸化和促進下游致癌信號級聯(lián)反應導致 MET 受體的組成性激活,。在 pRCC 中發(fā)現(xiàn)的 MET 激活突變的種類包括:V1092I (V1110),、H1094Y/R/L (H1112)、H1124D (H1142),、 L1195F/V (L1213),、F1200I (F1218),、V1188L (V1206)、Y1220I (Y1238),、D1228H/N (D1246),、Y1230C/D/H (Y1248)、M1131T (M1149)和 M1250T (M1268),。這些激活的 MET 突變也可以引起對 MET TKIs 的抗性,，從而引起對 MET TKI 的獲得性耐藥。 | |
| II. Description | |
BaF3（小鼠原 B 細胞）的生長和增殖需要 IL-3 的維持,。通過引入各種表達激酶的基因,， 能作為 BaF3 的驅動基因，讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖,，進而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴的驅動基因,，用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用，原理及流程見下圖所示,。 Figure 1. TPR-MET[Y1230H] BaF3 細胞的構建原理圖 | |
| III. Introduction | |
| Cell Line Name： | TPR-MET [Y1230H]/BaF3 |
| Host Cell: | Ba/F3 |
| Stability: | 16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Complete Culture Medium: | RPMI-1640+10%FBS+2ug/ml puromycin |
| Mycoplasma Status: | Negative |
| IV. Representative Data | |
1.WB of TPR-MET [Y1230H]/BaF3
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2.Sanger of TPR-MET [Y1230H]/BaF3
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3. Anti-proliferation assay
Figure 5. CTG Proliferation Assay of TPR-Met [Y1230H] BaF3 (C1). | |
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