NFAT-Luc/Jurkat NFAT-Luc/Jurkat
| I. Background | |
| 細(xì)胞內(nèi)鈣（Ca 2+）通過激活多種下游細(xì)胞介質(zhì)來調(diào)節(jié)多種細(xì)胞功能。細(xì)胞內(nèi) Ca 2+水平 升高導(dǎo)致 Ca 2+ 和鈣調(diào)蛋白依賴性磷酸酶鈣調(diào)磷酸酶的激活,。鈣調(diào)磷酸酶可去磷酸化并激活 轉(zhuǎn)錄因子活化 T 細(xì)胞核因子 （NFAT） 家族,，該家族在免疫功能、炎癥反應(yīng),、血管生成,、 細(xì)胞增殖和分化中起關(guān)鍵作用。 NFAT 家族由 NFAT1,、NFAT2,、NFAT3、NFAT4,、NFAT5 五個(gè)成員組成,，除 NFAT5 外， 該家族的所有其他成員都受細(xì)胞內(nèi) Ca 2+變化的調(diào)節(jié),。NFAT 蛋白具有一個(gè)保守的 N 末端結(jié) 構(gòu)域,，其中包含多個(gè)殘基，這些殘基在靜息條件下被磷酸化,。NFAT 蛋白的核轉(zhuǎn)位 在 N 末端調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域磷酸化后受到抑制,。當(dāng)細(xì)胞受到刺激時(shí)，殘基的去磷酸化是由 Ca 2+依賴性磷酸酶鈣調(diào)磷酸酶介導(dǎo)的,。去磷酸化暴露了核定位信號(hào),，并促進(jìn)了核轉(zhuǎn)位和 NFAT 調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo),。響應(yīng)鈣調(diào)磷酸酶 Ca 2+介導(dǎo)的激活,，NFAT 蛋白可以自行誘導(dǎo)基 因表達(dá),，也可以與其他轉(zhuǎn)錄因子協(xié)同誘導(dǎo)基因表達(dá)。NFAT 蛋白與其他轉(zhuǎn)錄因子（如激活 蛋白 1（AP-1）結(jié)合并協(xié)同發(fā)揮作用,，以誘導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄,。由于與其他轉(zhuǎn)錄因子相互作用， NFAT 蛋白可以整合來自不同途徑的信號(hào)并執(zhí)行多種細(xì)胞功能,。NFAT 蛋白在免疫細(xì)胞中的 重要功能之一是誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子表達(dá),。 | |
| II. Description | |
NFAT-Luc Jurkat 報(bào)告基因藥靶模型很好的模擬了體內(nèi) NFAT 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，原理見 下圖所示,。
Figure 1. NFAT-Luc Jurkat 細(xì)胞模型原理圖 | |
| III. Introduction | |
| Host Cell: | Jurkat |
| Expressed gene: | NFAT-Luciferase |
| Stability: | 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Synonym(s): | Nuclear factor of activated T cells; T cell |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | RPMI-1640+10%FBS+800 μg/ml hygromycin |
| Mycoplasma Testing: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen |
| Application(s): | Functional(Report Gene) Assay |
| IV. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Homo sapiens, human |
| Tissue: | Peripheral blood |
| Disease: | Acute T cell leukemia |
| Morphology: | Lymphoblast |
| Growth Properties: | Suspension |
| Ⅴ. Representative Data | |
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Figure 2.Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001（we strongly suggest to purchase from Cobioer). Induction of NFAT activity by PMA with Ionomycin in NFAT-Luc Jurkat(C7C17). | |
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