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RBP-4 ELISA
RBP-4 ELISA，即視黃/醇結(jié)合蛋白 4 酶聯(lián)免疫吸附測定（Retinol - Binding Protein 4 - Enzyme - Linked Immunosorbent Assay）,，是一種用于定量檢測生物樣本中視黃/醇結(jié)合蛋白 4 含量的常用實驗技術(shù),。視黃/醇結(jié)合蛋白 4 在體內(nèi)主要參與維生素 A 的運輸與代謝，且其含量變化與多種生理和病理狀態(tài)相關(guān),。
該技術(shù)的原理基于抗原抗體的特異性結(jié)合,。首先，將針對 RBP - 4 的特異性抗體包被在酶標(biāo)板的微孔表面,，此為捕獲抗體,。當(dāng)含有 RBP - 4 的樣本（如血清、血漿或組織勻漿）加入孔中時,，樣本里的 RBP - 4 會與包被抗體特異性結(jié)合,。接著，加入酶標(biāo)記的另一種針對 RBP - 4 不同抗原表位的檢測抗體,，它會與已結(jié)合在包被抗體上的 RBP - 4 結(jié)合,，形成 “包被抗體 - RBP - 4 - 酶標(biāo)檢測抗體" 的三明治結(jié)構(gòu)。之后,，向孔中添加酶的底物,，酶標(biāo)抗體上的酶催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生可檢測的信號,，通常是顏色變化或熒光信號,。通過酶標(biāo)儀測量信號強度，并與事先制備好的標(biāo)準(zhǔn)曲線對比,，就能精確計算出樣本中 RBP - 4 的含量,。
RBP - 4 ELISA 操作相對簡便且具有良好的重復(fù)性。整個流程包括樣本準(zhǔn)備,、加樣,、溫育反應(yīng)、洗滌去除未結(jié)合物質(zhì),、加底物顯色以及結(jié)果檢測等步驟,。只要嚴(yán)格遵循實驗操作規(guī)程，不同實驗室間也能獲得較為一致的結(jié)果。
該技術(shù)在多個領(lǐng)域有著重要應(yīng)用,。在臨床診斷中,，可輔助糖尿病及其并發(fā)癥的診斷與病情評估,，因為研究發(fā)現(xiàn)糖尿病患者體內(nèi) RBP - 4 水平往往異常升高,。在營養(yǎng)學(xué)研究里，能用于評估個體維生素 A 營養(yǎng)狀況,，為合理膳食提供依據(jù),。在藥物研發(fā)方面，可作為監(jiān)測藥物對維生素 A 代謝及 RBP - 4 水平影響的指標(biāo),，助力新藥的開發(fā)與評價 ,。