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MASP ELISA 技術：補體系統(tǒng)研究的重要手段
MASP（Mannan - binding lectin - associated serine protease,，甘露糖結(jié)合凝集素相關絲an酸蛋白酶）ELISA 技術是針對 MASP 蛋白進行定量檢測的重要方法,，在補體系統(tǒng)激活機制,、免疫相關疾病及感染性疾病研究中占據(jù)關鍵地位。MASP 作為凝集素途徑補體激活的關鍵酶，參與機體固有免疫防御,，其活性及含量變化與系統(tǒng)性紅斑狼瘡,、感染性休克、免疫缺陷病等疾病的病理進程密切相關,。
MASP ELISA 試劑盒通?；陔p抗體夾心原理設計。核心組分包含預包被抗 MASP 特異性抗體的微孔板,、MASP 標準品,、酶標記檢測抗體、顯色底物（如 TMB）及洗滌緩沖液等,。檢測時,，將樣本（如血清、血漿,、細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿）加入預包被抗體的微孔板,，若樣本中存在 MASP，會迅速與固相抗體特異性結(jié)合,；隨后加入酶標記檢測抗體,，形成 “固相抗體 - MASP - 酶標抗體" 夾心復合物。經(jīng)過多次嚴格洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后,，添加顯色底物,，在酶的催化作用下，底物發(fā)生顯色反應,，顏色深淺與樣本中 MASP 含量呈正相關,。最后，通過酶標儀在特定波長（如 450nm）下測定吸光度值,，并與標準曲線比對,，即可精準計算出樣本中 MASP 的濃度。
樣本處理需遵循嚴謹規(guī)范,。血清樣本采集后室溫靜置 1 - 2 小時,，待血液凝固后，以 3000 - 4000 轉(zhuǎn) / 分鐘離心 10 - 15 分鐘取上清,；血漿樣本需使用合適抗凝劑（如肝su鈉,、EDTA），采集后立即顛倒混勻并離心分離,；組織樣本需經(jīng)研磨,、勻漿、裂解等步驟,，再離心獲取組織勻漿上清,；細胞培養(yǎng)上清可直接離心去除細胞碎片后備用,。若不能及時檢測，所有樣本需分裝保存于 -20℃或 -80℃環(huán)境,，防止 MASP 降解或活性改變,，確保檢測結(jié)果準確性。