產(chǎn)品名稱:BNL CL.2(小鼠胚胎肝細胞)
貨號 :SX-C0081
培養(yǎng)基 :"*培養(yǎng)基有售,用我們拜力生物的*培養(yǎng)基,,細胞培養(yǎng)更省心,!"
規(guī)格 :5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
供應(yīng)商 :拜力生物
貨期 :7-10天
BNL CL.2(小鼠胚胎肝細胞)實驗事項:
建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,,計算時請后乘以稀釋倍數(shù),。
洗板方法
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,,重復(fù)此過程數(shù)次。
2. 自動洗板:如果有自動洗板機,,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為縱坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),OD值為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),,在對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進行分析,如curve expert 1.3,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實際濃度,。
◇ 液體類標(biāo)本
標(biāo)本必須為液體,不含沉淀,。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標(biāo)本量收集體積=100ul×檢測種類,。
◇ 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清,。如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
◇ 血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
◇ 尿液,、胸腹水、腦脊液:
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
◇ 細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。