產(chǎn)品名稱:Caco-2(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)
貨號(hào) :SX-C0101
培養(yǎng)基 :"*培養(yǎng)基有售,用我們拜力生物的*培養(yǎng)基,,細(xì)胞培養(yǎng)更省心!"
規(guī)格 :5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
供應(yīng)商 :拜力生物
貨期 :7-10天
Caco-2(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)實(shí)驗(yàn)事項(xiàng):
◇ 注意事項(xiàng):
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定,。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),,-20℃可保存1個(gè)月,。-70度可保存6個(gè)月。部分標(biāo)本需添加抑tai酶,。
◇ 液體類標(biāo)本
標(biāo)本必須為液體,,不含沉淀。包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個(gè)標(biāo)本量收集體積=100ul×檢測(cè)種類。
◇ 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清,。如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
◇ 血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,,使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑,。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣或加試劑時(shí),,請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),,前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性,。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣,。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),,試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,,以避免液體蒸發(fā),;洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度,。
4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù),。