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關(guān)鍵詞:流式細(xì)胞術(shù)|實驗技術(shù)服務(wù)
簡介:世界*品牌流式細(xì)胞術(shù)|實驗技術(shù)服務(wù)原裝,,質(zhì)量保證,*,。
流式細(xì)胞術(shù)|實驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系,。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計經(jīng)驗及實驗操作技巧,,承諾客戶不成功不收費,。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復(fù)我們的實驗結(jié)果。
產(chǎn)品品牌:
測序?qū)嶒灹鞒蹋?br>PI 染色操作步驟
1,、將單細(xì)胞懸液加入2ml圓底離心管中,,離心,1500rpm , 5min,,棄上清液,。
2、加入PBS 1ml離心洗滌1次,,棄上清,。
3、加入2ml預(yù)冷的70%酒精,,4℃固定30min,,或是-20℃固定。
4,、離心,,棄上清液。
5,、用1×PBS 1ml洗滌1次,,離心。
6,、加入RNase A (工作濃度20ug/ml)于500ul 1×PBS中,,37℃孵育30min,離心,。
7,、用1×PBS 1ml洗滌1次,,離心。
8,、加入PI(工作濃度50ug/ml) 于500ul 1×PBS中,,室溫避光孵育30min。
9,、混勻,,過300目篩網(wǎng),置流式管中,, 4℃冰箱保存,,待測。
GFP PI染色操作步驟
1,、將單細(xì)胞懸液加入2ml圓底離心管中,,離心,1500rpm , 5min,,棄上清液,。
2、加入PBS 1ml離心洗滌1次,,棄上清,。
3、加入2ml預(yù)冷PFA,,PFA的濃度根據(jù)細(xì)胞的特點進(jìn)行調(diào)節(jié),,4℃固定30min。
以下步驟同PI 染色操作步驟的
細(xì)胞表面直接免疫熒光染色操作步驟
1,、將單細(xì)胞懸液加入2ml圓底離心管中,,離心,1500rpm,,5min,,棄上清液。
2,、以冷PBA 1ml,,離心洗滌,棄上清液,。
3,、加入用PBA稀釋的熒光素標(biāo)記的抗體200ul。用微量移液器輕輕吹打混勻,,4℃或置冰上孵育30min-1h,。
4、離心棄上清液,。
5,、加入冷PBS1ml,離心洗滌2次,,以除去未結(jié)合的多余抗體成分。
6,、向細(xì)胞中加入冷PBS 500ul,吹打混勻,置流式管中,,4℃避光保存,,待測。
細(xì)胞表面間接免疫熒光染色操作步驟
1-2,、同細(xì)胞表面直接免疫熒光染色操作步驟
3,、 用PBA稀釋的*抗體200ul,對照管加入對應(yīng)于一抗的正常實驗動物IgG,,輕輕吹打混勻,,4℃或置冰上孵育1.5-2h。離心,,棄上清,。
4、 BS1ml離心洗滌1次,,以去除多余的未結(jié)合的特異性抗體,。
5、 PBA適當(dāng)稀釋的熒光素標(biāo)記的第二抗體200ul,。吹打混勻,,4℃或置冰上孵育30min,避光,。
6,、 PBS 1ml離心洗滌2次。
7,、將細(xì)胞重新懸浮于500ulPBS中,,混勻,置流式管中,,避光,,4℃冰箱保存,待測,。
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