關鍵詞:RIA(放射免疫法)服務|實驗技術服務
簡介：世界*品牌RIA(放射免疫法)服務|實驗技術服務原裝，質量保證,*。
RIA(放射免疫法)服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系,。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧，承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產品的同時，我們也會提供相應的原始數據和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗,。另一方面，我們所有的實驗數據真實可信,，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,，客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌：RIA(放射免疫法)服務|實驗技術服務   http://www.,。,。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程：
臨床上甲胎蛋白（AFP），癌胚抗原（CEA）,，8 一微球蛋白（pz—MG ）,，鐵蛋白（Fer）,，人絨毛膜促性腺激素p亞單位（HCG-13）等的檢測都是競爭性RIA法原理,。競爭性RIA法，根據加樣順序與溫育次數的區(qū)別,，反應方式分三種：平衡法,，將非標記抗原（被測物與標準品）、抗體,、標記抗原依次加入反應管,，混勻后一次性溫育至反應達到動態(tài)平衡，再加分離劑分離B（復合物）與F（游離物）如：AFP,，8 一MG,，Fer；順序加樣法,，先將非標記抗原（被測物與標準品）,，與抗體在反應管內作*次溫育，待反應達到動態(tài)平衡后。加入標記抗原,，再作第二次溫育后,，分離B與F如：CEA；急診檢測法：為臨床急需檢測結果而提出的反應方式,，不等RIA 反應達到動態(tài)平衡就終止反應,；分離劑的選擇有，PEG（聚乙二醇）,，第二抗體等,。
現在一般采用的是：第二抗體與PEG合用的方法，稱為雙抗體一PEG法,。
PEG原理：PEG濃度達到7 一9 時能使抗原一抗體復合物沉淀,。
優(yōu)點：經濟，簡便,，通用,。
缺點：重復性差，非特異性結合率高,。
第二抗體：*抗體是可與被測抗原進行特異結合的抗體,，來自家兔或豚鼠。用*抗體為抗原,，作用到羊,，馬身上，產生的抗*抗體的抗體稱第二抗體,。第二抗體與*抗體在適當條件下發(fā)生特異性結合,，生成分子量很大的免疫復合物（AgAb ×Ab ），能自然沉淀,。
優(yōu)點：分離效果好,。非特異性結合率低。
缺點：增加經費投入,。需要第二次溫育,，延長了時間。
所以就產生了兩者合用的雙抗體一PEG法,，它結合了上述兩種方法的優(yōu)點,。
二、非競爭性RIA,，又稱免疫放射分析（IRMA）
主要特點：標記的是抗體,。
按反應原理分為兩種：
（一）單位點IRMA
其原理：抗原只有一個抗原決定簇，所測的抗原為小分子抗原,，Ab+AgAg Ab+ Ab+ ImAd—Ag ImAd—AgAb+Ag Ab（去除）（負相關）：（ImAd—Ag）固相抗原免疫吸附劑,，一般用聚苯乙烯塑料珠包被抗原,；雙位點IRMA：抗原有兩個抗原決定簇，所使用的兩種亞型抗體在與同一抗原分子結合時互不干擾ImAd—Ab+AgImAd—Ab—Ag+ AbImAd-Ab—Ag- Ab+ Ab（過剩的,，游離的）：（ImAd—Ab）固相抗體免疫吸附劑,，一般用聚苯乙烯塑料珠包被抗體。
（二）雙位點IRMA,，又稱雙抗體夾心法
從加樣測定順序上看,，有三種方法：固相抗體先與未知抗原結合，再與標記抗體結合（正向兩步法）,。然后去除游離的標記抗體,，測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數；未知抗原先與標記抗體結合,，再與同相抗體結合（反向兩步法）,。然后去除游離的標記抗體，測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數,；未知抗原與固相抗體和標記抗體同時反應（一步法,，又稱同時加樣法）。然后去除游離的標記抗體,，測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數,。
這三種方法都生成夾心狀的抗體一抗原一抗體復合物，故又稱雙抗體夾心法,。
糖類抗原CA50,，CA125就用的是其中的第三種方法（一步法），血清中的未知抗原與固相抗體和標記抗體同時反應,，生成夾心狀的抗體一抗原一抗體復合物,，然后去除游離的標記抗體，測固相抗體一抗原一標記抗體復合物的放射性計數,。
三,、RIA法的影響因素
pH和離子強度；反應溫度,，溫度一般為37℃,，也有45℃,，室溫,，4℃ 冰箱；反應時間,，操作中的注意事項：戴手套,、防護鏡等，將試劑盒從冰箱中取出,，室溫下放置30 min方可使用,。
（1）編號：*排是標準管：根據標準品濃度由低到高A,，B，C,，D,，E，F,，G……,；第二排是被測樣品1，2,，3,，4，5,，6,，……。
（2）加樣要準確,，移液器的使用（兩個檔位,，一檔吸人，二檔排出）吸頭（一個標本一個吸頭,，避免互相污染）,。加試劑：先看瓶簽，再搖勻,，zui后吸人,。（標記物一般為紅色，一抗為蘭色）,。
（3）溫育時間要保證：按說明書中所要求的時間溫育,，可以延長，不能縮短,。
（4）分離劑加入：混勻靜置時間,，可以延長，不能縮短,。保證抗原抗體復合物與第二抗體的充分結合,。
（5）溫度：注意觀察水浴箱的水溫，誤差不能太大,，為±1℃ ,，室溫21℃左右。
（6）離心時間：也應按說明書中所要求來操作,，轉速一般為3 500r/min,。往離心機里放反應管時，盡量讓它直立（因為傾斜可能會使液體流出）,。吸上清液時,，沉淀物在試管底部,，真空泵的吸頭頭部不能直接插人到試管底部中央（會吸走沉淀物，而我們的目的是分離保留沉淀物）,，應該使吸頭貼著試管管壁往下放,，并且試管要稍微傾斜，但要在即將插到沉淀物邊緣時停止,，快速上升取出,。少留一點點上清液也可。主要是保證沉淀物完整,。
（7）進人免疫計數器測量時,，注意觀察做出的曲線好壞：是不是需要修改，剔除壞點,。
（8）報結果：碰到異常結果,，要再次看一看沉淀物是否都在，患者情況如何,，結果是否與患者情況相符,，方可報出。非競爭性RIA法中,，清洗固相包被珠時,，清洗次數要嚴格按說明書中所要求來操作，不得減少,。
雖然RIA法的影響因素很多,，但操作中只要注意上述事項，RIA法的穩(wěn)定性還是相當不錯的,。主要是它存在放射污染,，這個問題不易解決，影響了它以后的發(fā)展,，如今電化學發(fā)光免疫分析,，化學發(fā)光免疫分析，酶聯免疫分析,，磁酶免疫分析等相繼推出,，發(fā)展很快，RIA法將被淘汰,。