關鍵詞:MTT檢測服務|實驗技術服務
簡介：世界*品牌MTT檢測服務|實驗技術服務原裝,，質量保證,*,。
MTT檢測服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧,，承諾客戶不成功不收費,。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時，我們也會提供相應的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗,。另一方面,，我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,，客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果,。
產(chǎn)品品牌：   http://www.。,。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程：
MTT為黃色化合物,，是一種接受氫離子的染料，在活細胞中作用于線粒體的呼吸鏈,，MTT在琥珀酸脫氫酶和細胞色素C的作用下生成藍色的formazan結晶,，formazan結晶的生成量與活細胞數(shù)目成正比，生成的formazan結晶可溶解在DMSO中，利用酶標儀測定570 nm處的光密度OD值,，可以反映出活細胞數(shù)目和細胞活力,。死細胞中由于沒有琥珀酸脫氫酶，因此不能還原MTT生成formazan結晶,。
優(yōu)點：經(jīng)濟,、靈敏度高，可用于大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選,、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等,。
缺點：由于MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的formazan結晶產(chǎn)物不溶于水，需有機溶劑溶解后才能檢測,，這不僅使工作量增加,，也會對實驗結果的準確性產(chǎn)生影響，而且有機溶劑對實驗人員也有損害,。
①將對數(shù)生長期的細胞濃度調整為1~10×104細胞/ml,，按103~104個細胞接種于96孔板，每孔100 μl,；
②培養(yǎng)細胞24小時后,，對其進行不同處理，每個處理設三個平行對照,；
③（MTT法）適當培養(yǎng)時間后,，取出細胞，倒掉培養(yǎng)液,，每孔加入5 mg/ml新鮮配制的MTT溶液,，溫育4小時,，再次倒掉上清液,，每孔加入200 ml DMSO，搖勻后,，酶標儀檢測吸光值,。
③（臺盼藍拒染法）適當培養(yǎng)時間后，收集細胞,，經(jīng)臺盼藍染色,，在倒置顯微鏡下計數(shù)藍染及不染色細胞，計算細胞存活率,。
應用舉例：
1.新藥篩選,；
2.細胞毒性試驗；
3.腫瘤放射敏感性實驗,。
服務流程：
1.細胞處理,；
2.細胞計數(shù)；
3.盼蘭染色法測細胞活力；
4.MTT法測細胞相對數(shù)和相對活力,。 
注意事項
1,、選擇適當?shù)眉毎臃N濃度。
2,、避免血清干擾：一般選小于10%的胎牛血清的培養(yǎng)液進行試驗,。在呈色后盡量吸盡孔內殘余培養(yǎng)液。
3,、設空白對照：與試驗平行不加細胞只加培養(yǎng)液的空白對照,。其他試驗步驟保持一致，zui后比色以空白調零,。
MTT實驗吸光度zui后要在0-0.7之間,，超出這個范圍就不是直線關系,IC50是半抑制率，意思是抑制率50％的時候藥物的濃度,。把藥品稀釋成不同的濃度,，然后計算各自的抑制率，以藥品的濃度為橫坐標,，抑制率為縱坐標作圖,，然后得到50％抑制率時候的藥品濃度，就是IC50,。要點：藥品2倍稀釋,，多做梯度.