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關(guān)鍵詞:(原核)可溶蛋白表達|實驗技術(shù)服務(wù)
簡介:世界*品牌(原核)可溶蛋白表達|實驗技術(shù)服務(wù)原裝,,質(zhì)量保證,*,。
(原核)可溶蛋白表達|實驗技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系,。
我們具備豐富的蛋白表達設(shè)計經(jīng)驗及實驗操作技巧,,承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時,,我們也會提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費精力重復(fù)實驗,。另一方面,,我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質(zhì)粒,,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復(fù)我們的實驗結(jié)果,。
產(chǎn)品品牌:(原核)可溶蛋白表達|實驗技術(shù)服務(wù) http://www.。,。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
實驗描述
利用基因合成,、cDNA克隆、反轉(zhuǎn)錄等方法,,獲得目的基因,,將目的基因亞克隆至表達載體pSumo-Mut,目的基因在N端融合Sumo標簽蛋白,,通過測序和酶切驗證,,確證獲得亞克隆正確的表達質(zhì)粒。
利用構(gòu)建好的表達質(zhì)粒,,轉(zhuǎn)化Arctic Express宿主菌,, 在11度低溫IPTG誘導(dǎo)條件下,SDS-PAGE檢測目標蛋白表達情況,,確認蛋白分布在上清或是沉淀中,。
如果目標蛋白產(chǎn)物分布與上清中,通過Ni柱親和純化,, 獲得目的蛋白,;如果目標蛋白分布于沉淀中,則通過包涵體梯度洗脫后,,重溶獲得目標蛋白,,必要的話,重溶蛋白在進一步通過親和純化提高純度,。
純化后的蛋白經(jīng)過Sumo蛋白酶酶切,,蛋白N端將會*裸露,不留任何氨基酸殘基,,酶切后的混合物經(jīng)Ni柱親和純化,,可以去除融合蛋白、Sumo標簽蛋白和Sumo蛋白酶,,剩余的蛋白即為酶切后目的蛋白,。
服務(wù)內(nèi)容
針對客戶蛋白表達不理想的問題,我公司根據(jù)客戶提供的基因序列對實驗進行整套優(yōu)化(基因設(shè)計,、基因優(yōu)化,、基因合成、亞克隆,、蛋白表達條件優(yōu)化及可溶性測試,、原核蛋白表達及檢測),,并提供給客戶實驗中每個步驟詳細的實驗報告。
交付
實驗各階段的實驗評估報告(分為密碼子優(yōu)化報告,、載體-宿主優(yōu)化報告,、表達條件優(yōu)化報告和蛋白可溶性評估)
如果客戶需要蛋白,我們可提供:
>5mg 可溶性蛋白
蛋白純度>90%
融合標簽蛋白
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