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上海拜力生物科技有限公司

細胞傳代培養(yǎng)服務|實驗技術服務

時間:2015-5-21閱讀:237

關鍵詞:細胞傳代培養(yǎng)服務|實驗技術服務
簡介:世界*品牌細胞傳代培養(yǎng)服務|實驗技術服務原裝,質量保證,*,。
細胞傳代培養(yǎng)服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系,。
我們具備豐富的蛋白表達設計經(jīng)驗及實驗操作技巧,,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數(shù)據(jù)真實可信,,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據(jù)我們的實驗報告重復我們的實驗結果,。
產(chǎn)品品牌:   http://www.,。,。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程:
實驗材料和器材
材料:培養(yǎng)瓶,試管,,移液管,,巴斯德吸管,廢液缸,,75%酒精棉球,,酒精燈,培養(yǎng)細胞,。
藥品:培養(yǎng)基(RPMI1640或DMEM),,小牛血清或胎牛血清,0.25%胰蛋白酶,,Hank's液,。
儀器:CO?培養(yǎng)箱,倒置顯微鏡,,超凈臺,。
實驗步驟
1.人無菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒雙手,。
2.倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),,確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液置37℃下預熱,。
3.超凈臺臺面應整潔,,用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。
4.打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右,,關閉超凈臺的紫外燈,,打開抽風機清潔空氣,除去臭氧,。
5.點燃酒精燈;取出無菌試管,,巴斯德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內。
6.將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上,。
7.倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3mLHanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基,,或用少量胰酶涮洗一下,。
8.每個大培養(yǎng)瓶加入1mL胰酶,小瓶用量酌減,,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察,,當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,,然后將胰酶倒掉,。注意勿使細胞提早脫落入消化液中,。
9.加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7~10mL/大瓶,,3~5mL/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中,。蓋上瓶蓋,,適度擰緊后再稍回轉,以利于CO?氣體的進入,,將培養(yǎng)瓶放回CO?培養(yǎng)箱,。
10.對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做,??蓪⒓毎麘乙哼M行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,,然后分裝到各瓶中,。

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