mRNA 或信使 RNA 是由核糖體翻譯用于蛋白質合成的單鏈 RNA 模板,。雅各布和莫納德創(chuàng)造了“信使RNA"一詞,。它是一條長聚合物鏈,，由通過磷酸二酯鍵共價連接的核苷酸組成。它含有四個含氮堿基,，腺嘌呤,、尿嘧啶、胞嘧啶和鳥嘌呤,。RNA 和其中一條 DNA 鏈是互補的,，但在 DNA 中，尿嘧啶取代了胸腺嘧啶,。

成熟的 mRNA 由以下區(qū)域組成：5' 帽,、5' UTR、編碼區(qū),、3' UTR 和 poly（A） 尾部,。

編碼區(qū)域：它是一串密碼子，即核苷酸的三聯體,。每個密碼子都編碼一個特定的氨基酸,，該氨基酸通過核糖體翻譯成多肽鏈中的氨基酸。編碼區(qū)的起始密碼子是“AUG",，并以任何終止密碼子結尾,，即 UAA,、UAG 或 UGA。編碼序列的一部分可能具有調節(jié)功能,。

未翻譯區(qū)域 （UTR） 分別位于編碼區(qū)域之前和之后的 5' 和 3' 區(qū)域,。未翻譯區(qū)域存在于起始密碼子之前和終止密碼子之后。它們參與基因表達,。它們在 mRNA 定位,、翻譯和 RNA 穩(wěn)定性中也起著至關重要的作用。

5' Cap- 甲基鳥苷三磷酸帽存在于 5' 端,。

Poly（A） Tail-A 聚腺苷酸尾巴位于 3' 端,。

在大多數真核生物中，當 mRNA 編碼一種蛋白質時,，mRNA 的編碼區(qū)被稱為單順反子,。在原核生物中，大多數 mRNA 編碼一種以上的蛋白質;這稱為多順反子,。這些蛋白質大多具有相關功能,，并由具有啟動子和操作子區(qū)域的單個調控區(qū)調控。在人類中,，線粒體基因組是多順反子的。

mRNA 的合成 – 轉錄和加工

轉錄是從 DNA 合成 mRNA 的過程,。

在原核生物中,，所有類型的 RNA 都由單個 DNA 依賴性 RNA 聚合酶轉錄。在這里,，不需要 mRNA 處理;因此,，轉錄和翻譯可以耦合，因為這兩個過程都發(fā)生在胞質溶膠中,。

在真核生物中,，RNA 聚合酶 II 轉錄前 mRNA。Pre-mRNA 或主轉錄本隨后在細胞核中進一步轉化為 mRNA,。它被稱為hnRNA,，或異質核RNA。然后將成熟的 mRNA 轉移到胞質溶膠中進行翻譯后處理,。

轉錄

從 DNA 合成 RNA 稱為轉錄,。以DNA為模板，DNA依賴性RNA聚合酶在5'至3'方向上合成RNA,。極性為 5' 至 3' 的 DNA 鏈稱為“編碼鏈",，而極性為 3' 至 5' 的 DNA 鏈則稱為“模板鏈"。轉錄RNA的核苷酸序列與編碼鏈匹配,。

DNA 中的轉錄單元由三個主要區(qū)域組成,，所有參考都與編碼鏈有關：

啟動子存在于結構基因的 5' 末端,。

啟動子和終止子之間存在結構基因。

終止子存在于結構基因的 3' 末端,。

轉錄的三個步驟如下：

1. 起始：RNA聚合酶通過與啟動子區(qū)域結合開始轉錄,，進一步啟動DNA雙螺旋解旋。

2. 外延：RNA聚合酶將互補的三磷酸核苷作為底物添加到鏈中,，并且隨著DNA雙螺旋的廣泛開放而繼續(xù)延伸,。RNA 轉錄發(fā)生在 5' 到 3' 方向。

3. 終止：轉錄停止,，mRNA 從 RNA 聚合酶中分離,。

加工

HnRNA，即新生成的 mRNA 或初始轉錄本,，必須經過處理才能成為成熟的 mRNA,。HnRNA 經過轉錄后處理以產生成熟的 mRNA。功能性 mRNA 進一步從細胞核轉運,。翻譯或蛋白質合成發(fā)生在細胞質中,。

外顯子和內含子都存在于 hnRNA 中。轉錄后修飾包括剪接,、加帽和拖尾,。

• 剪接：該過程涉及從成熟的mRNA鏈中切除內含子。

• 加帽：在這里,，在hnRNA的5'端添加核苷酸帽,，即甲基鳥苷三磷酸。

• 拖尾：該過程處理在 3' 端添加 200-300 個腺苷酸殘基,。poly（A） 尾部保護 RNA 免受核酸外切酶降解,，還參與轉錄終止、mRNA 轉運和翻譯,。

核孔復合物在hnRNA加工后將功能齊全的mRNA轉運到細胞質中,，在那里它被翻譯成多肽鏈。

mRNA的類別：

報告基因mRNA：這些 mRNA 類似于*全加工,、加帽和多聚腺苷酸化的 mRNA,，并準備好通過核糖體進行翻譯。大多數報告基因 mRNA 可未經修飾或用 5-甲氧基尿苷修飾,，以減少先天免疫反應,。研究轉染效率的理想對照。

基因組編輯 mRNA：基因組編輯,，也稱為基因編輯,，是指能夠修飾生物體 DNA 的一系列科學技術。在基因組中的特定位點,，這些技術有助于添加,、去除或修飾遺傳物質,。已經開發(fā)了幾種基因組編輯方法。CRISPR-Cas9 代表成簇的規(guī)則間隔短回文重復序列和 CRISPR 相關蛋白 9,，是一個眾所*知的例子,。CRISPR-Cas9 是一種天然存在的基因組編輯系統(tǒng)，細菌將其作為免疫反應進行部署,。

疫苗 mRNA：mRNA 疫苗使用一種稱為 mRNA 的分子的拷貝來非法產生免疫反應,。該疫苗將抗原編碼的mRNA輸送到免疫細胞中，免疫細胞使用設計的mRNA作為藍圖來構建通常由病原體（如病毒）或癌細胞產生的外來蛋白質,。這些蛋白質分子激活適應性免疫反應,，指示身體識別和消除相關的病原體或癌細胞。mRNA通過封裝在脂質納米載體中的mRNA的納米制劑給藥,，其保護RNA鏈并促進其吸收到細胞中,。

基因替代 mRNA：mRNA在基因替代中的應用相當流行。許多蛋白質,，包括膜結合的蛋白質,、細胞內蛋白質或經過翻譯后修飾或加工的蛋白質，不能被外源性蛋白質遞送所取代,。細胞內 mRNA 表達大大增加了可通過蛋白質替代治療的適應癥數量,。分泌的人促紅細胞生成素 （EPO） 蛋白可以使用酶聯免疫吸附試驗在血清中輕松檢測。血細胞比容測定可用于確定EPO對紅細胞產生的刺激程度,。

熒光 mRNA：Cy5 GFP mRNA：Cy5 GFP mRNA被設計用于產生高表達水平的綠色熒光蛋白,。它可用于控制轉染效率。當用 Cy5 標記時,，可以很容易地追蹤 F-Luc mRNA，以分析 mRNA 的遞送和翻譯效率,。

編程為自毀

MRNA是細胞的中間信使,，是一種重要的安全機制。任何位于細胞外的RNA都會立即被稱為RNase的酶破壞,，從而防止入侵者利用細胞機制制造外來蛋白質,。這些酶在識別 RNA 編碼中的結構和 U 后破壞信息，保護細胞免受錯誤指令的影響,。通過根據需要“打開"或“關閉"藍圖,，mRNA還為細胞提供了一種調節(jié)蛋白質合成速率的方法。信使RNA的指令定時過期,。代碼中的 U,、單鏈形式、核糖和 mRNA 的獨*序列都有助于其較短的半衰期,。所有這些特征共同作用,，使信息能夠被“讀取",，翻譯成蛋白質，然后對于一些需要嚴格監(jiān)督的蛋白質,，在幾分鐘內迅速銷毀,，對于其他蛋白質，則長達幾個小時,。一旦指令消失,，蛋白質生產就會停止，直到蛋白質工廠收到新的信息,。

功能與應用

mRNA的主要作用是充當蛋白質生產的模板,。位于細胞質中游離或附著在粗糙內質網上的核糖體可以進行翻譯 （RER）。

RNA 中存在的遺傳信息被翻譯成多肽鏈中存在的氨基酸,。多肽鏈中氨基酸的順序由 mRNA 中的核苷酸或密碼子序列決定,。每個三重密碼子或三核苷酸序列僅編碼一種特定的氨基酸。多個密碼子可用于編碼氨基酸,。密碼子不重疊,。

mRNA 指導細胞合成蛋白質。修飾的mRNA序列的施用可用于治療疾病,，也可以用作疫苗,。輝瑞-BioNTech 和 Moderna 疫苗是 mRNA 疫苗的兩個例子，它們已被批準限制使用,，并且正在開發(fā)用于對抗 COVID-/19 感染,。

OZ Biosciences 提供廣泛的 mRNA，這些 mRNA 模擬*全加工的成熟 mRNA,。這些 mRNA 通過使用 5' cap-1 結構和 3' poly（A） 尾部來穩(wěn)定它們,，從而針對穩(wěn)定性和性能進行了優(yōu)化。它們用 5-甲氧基尿苷（5moU 取代 U）或 N1-甲基假尿苷 （N1-mψ） 修飾以減少先天免疫反應,。我們還提供未經修飾的 mRNA,。

以下是即用型mRNA的類別：

• 報告基因mRNA：研究轉染效率的理想對照

• 基因組編輯 mRNA：Cas9 mRNA 用于 CRISPR 基因組編輯

• 疫苗mRNA：非常適合作為免疫或疫苗研究的對照

• 基因替代 mRNA：EPO mRNA的

• 熒光 mRNA：Cy5 GFP mRNA、Cy5 GFP mRNA

我們提供微克到多克級的定制 mRNA,，從幾百個堿基到幾千個堿基不等,，具有多種修飾，包括帶帽的 5' 末端修飾,、內部修飾（如 5-甲氧基尿苷（可提供其他修飾核苷酸））和 3' 修飾（如 poly-A 尾）,。可使用 Cy5,、Cy3 或其他選項進行熒光標記,。