小鼠腦立體實驗時如何驗證靶位是否準確,?
小鼠腦立體實驗時驗證靶位是否準確步驟:
當注射完染液后,移走微量注射器,但仍以耳棒和切牙鉤三點固定鼠顱,不從立體定向儀上卸下來,。用大剪刀于枕骨大孔處斷頭,,再用骨鉗掀開枕骨、頂骨,暴露小腦,,從小腦開始向前移行,,邊滴注4%的多聚甲醛固定液,邊用剃須刀刀片垂直切下腦組織(未固定的鼠腦組織軟如豆腐狀,未經(jīng)固定劑固定不能切取成片的腦組織),。滴注甲醛液,使腦組織固定,,須較長的時間(12 h以上),不可急于求成,應分多次隨切隨滴,逐漸向著靶.位平面滴注甲醛液,、呈片狀切取腦組織,直至暴露針道。注意要使所切的腦組織切面垂直,、平滑,待一步步切到靶位時,,對照圖譜檢查靶位是否準確。觀察靶點和針道與靶位坐標之間的差異,分別修正AP,、L.V三軸數(shù)值(在無針道偏斜的情況下)為下次打靶提供修正后的坐標,。