分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段,。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息,。可以用標準光圖譜再結(jié)合其它手段進行定性分析,。
實驗證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同,，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度,，以確定選擇哪一種溶劑。
實驗室選擇時需要根據(jù)自己實驗室的需要和目的用途來考慮,，光學(xué)構(gòu)造和光源,、探測方法、樣品類型和數(shù)據(jù)處理等都是要考慮的因素,。
光學(xué)構(gòu)造
一般來說,，紫外光分光光度計分為單光束和雙光束兩類。顧名思義,，單光束型主要是依賴單束光進行測量,。一束給定波長的光通過對照物，然后再通過實際樣品溶液,，就能得到吸光結(jié)果,。
雙光束型則是通過一個斬光輪將一束光分成兩束，分別測量對照樣品和實際樣品,?？梢孕』馄坪蜏p少測量時間。一些雙光型光度計不利用斬光輪,，而是利用一種光束分光器來代替,，將一束光分成兩束平行的光然后同時測量對照樣品和目的樣品。因為增加了測量的速度,，所以雙光束分光光度計在測量一些溶液隨時間動態(tài)變化的研究中大有用處,。
光源和檢測方法
分光光度計的光譜也是需要考慮的一個重要因素。實驗室研究人員希望省錢購入專門儀器定量核酸,、蛋白或者細菌的生長情況,。
分光光度計的帶寬很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度?？梢酝渡涑鰧嶒炓蟮墓庾V,。一種嚴格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進行高分辨率的吸光測量?？勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實驗需要,。
為了測量吸光值，分光光度計制造商通常使用光電倍增管和光敏二極管,。PMTs提供快速的反應(yīng)時間和良好的靈敏度,，并且可以在紫外光譜調(diào)節(jié)至特定的范圍。但一些制造商依賴于光敏二極管的動態(tài)范圍在數(shù)秒內(nèi)行使所有的光譜測量,。
樣品類型
在大部分的樣品類型中,，分光光度計可接受樣品孔,、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板,。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規(guī)模的實驗室需求,。但盡管對于小實驗室來說，制造商仍然提供了多種容器轉(zhuǎn)換器來滿足通量的要求和減少實驗時間,。
用小試管cuvette裝樣品容量一般從1 μl-5ml,，并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。體現(xiàn)了柔韌性,。
數(shù)據(jù)管理
大部分單機型的分光光度計包含了驅(qū)動儀器運行和管理數(shù)據(jù)的軟件,。高性能的儀器，通常與PC機一起聯(lián)用,，需要從制造商提供額外的軟件,。同時用戶也可以選擇升級軟件以滿足他們的需要。
另外一個值得考慮的因素是數(shù)據(jù)的終使用,。各獨立實驗室都有各自感興趣的實驗結(jié)果,。
