預包被抗原微孔板:提供抗原抗體反應的固相載體,保證檢測的特異性和穩(wěn)定性,。
酶標二抗工作液:含有能特異性結合軍團菌抗體 IgG 的酶標二抗,,攜帶可催化底物顯色的酶。
標準品:一系列已知濃度的軍團菌抗體 IgG 標準品,,用于繪制標準曲線,,以便準確計算樣本中抗體濃度,。
底物液:與酶標二抗上的酶發(fā)生反應,產生可檢測的顏色變化,,從而實現結果判讀,。
濃縮洗滌液:用于洗滌微孔板,去除未結合的物質,,降低背景干擾,,提高檢測結果的準確性。
終止液:用于終止底物反應,,穩(wěn)定顯色結果,,便于酶標儀準確讀取吸光度。
實驗前準備:從冷藏環(huán)境取出試劑盒,,平衡至室溫,。準備好所需的樣本和實驗器材,如移液器,、酶標儀等,。
加樣:將標準品、陰性對照,、陽性對照及待測樣本分別加入預包被微孔板的相應孔中,,在適宜溫度下溫育,讓抗原抗體充分結合,。
洗滌:用稀釋后的濃縮洗滌液對微孔板進行多次洗滌,,徹di去除未結合的物質。
加酶標二抗:加入酶標二抗工作液,,溫育使酶標二抗與已結合的 IgG 抗體充分反應,。
再次洗滌:重復洗滌步驟,確保洗凈未結合的酶標二抗,。
顯色:加入底物液,,在避光條件下顯色一定時間,使顏色充分反應,。
終止反應:加入終止液,,終止顯色反應。
測定:用酶標儀在特定波長下測定各孔的吸光度,,根據標準曲線判斷樣本中軍團菌抗體 IgG 的情況,。