預包被抗原微孔板:提供抗原抗體反應的固相載體,,保證檢測的特異性和穩(wěn)定性,。
酶標二抗工作液:含有能特異性結(jié)合軍團菌抗體 IgG 的酶標二抗,攜帶可催化底物顯色的酶,。
標準品:一系列已知濃度的軍團菌抗體 IgG 標準品,,用于繪制標準曲線,以便準確計算樣本中抗體濃度,。
底物液:與酶標二抗上的酶發(fā)生反應,,產(chǎn)生可檢測的顏色變化,從而實現(xiàn)結(jié)果判讀,。
濃縮洗滌液:用于洗滌微孔板,,去除未結(jié)合的物質(zhì),降低背景干擾,,提高檢測結(jié)果的準確性,。
終止液:用于終止底物反應,穩(wěn)定顯色結(jié)果,,便于酶標儀準確讀取吸光度,。
實驗前準備:從冷藏環(huán)境取出試劑盒,平衡至室溫,。準備好所需的樣本和實驗器材,,如移液器,、酶標儀等。
加樣:將標準品,、陰性對照,、陽性對照及待測樣本分別加入預包被微孔板的相應孔中,在適宜溫度下溫育,,讓抗原抗體充分結(jié)合,。
洗滌:用稀釋后的濃縮洗滌液對微孔板進行多次洗滌,徹di去除未結(jié)合的物質(zhì),。
加酶標二抗:加入酶標二抗工作液,,溫育使酶標二抗與已結(jié)合的 IgG 抗體充分反應。
再次洗滌:重復洗滌步驟,,確保洗凈未結(jié)合的酶標二抗,。
顯色:加入底物液,,在避光條件下顯色一定時間,,使顏色充分反應,。
終止反應:加入終止液,終止顯色反應,。
測定:用酶標儀在特定波長下測定各孔的吸光度,,根據(jù)標準曲線判斷樣本中軍團菌抗體 IgG 的情況。