產(chǎn)品名稱:Eca-109(人食管癌細(xì)胞)

貨號 :SX-C0154

培養(yǎng)基 :"*培養(yǎng)基有售,用我們乾思生物的*培養(yǎng)基,，細(xì)胞培養(yǎng)更省心,！"

規(guī)格 :5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

供應(yīng)商 :乾思生物

貨期 :7-10天

Eca-109(人食管癌細(xì)胞)實驗事項：

1.  試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑,。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,，避免交叉污染。

2.   加樣：加樣或加試劑時,，請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,，將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間,，從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用多道移液器加樣。

3.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,，每隔10分鐘),，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),，避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù),。

4.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射,。

建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,，請先稀釋后再測定,，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

◇      血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。收集上清。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。

◇      血漿：

應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。

◇      尿液,、胸腹水,、腦脊液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。

◇      細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。