產(chǎn)品名稱:CW-2(人結(jié)腸腺癌細胞)

貨號 :SX-C0137

培養(yǎng)基 :"*培養(yǎng)基有售,用我們乾思生物的*培養(yǎng)基,，細胞培養(yǎng)更省心,！"

規(guī)格 :5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

供應商 :乾思生物

貨期 :7-10天

CW-2(人結(jié)腸腺癌細胞)實驗事項：

1.  試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑,。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,，避免交叉污染。

2.   加樣：加樣或加試劑時,，請注意在吸取標本 / 標準品,，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,，將會導致不同的“預孵育"時間,，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用多道移液器加樣。

3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā),，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),，酶標板加上蓋或覆膜,，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作,，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度,。

4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,，同時要消除板底殘留的液體和手指印,，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。

5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。標準品、檢測溶液A工作液,、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆,。請確配置標準品及工作液,，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl),，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差,；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液,。

◇      液體類標本

標本必須為液體,，不含沉淀。包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。

◇      血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。收集上清。如有沉淀形成,，應再次離心,。

◇      細胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。

◇      組織標本：

切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin,。用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存,，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。