產品名稱:BEL-7404(人肝癌細胞)
貨號 :SX-C0073
培養(yǎng)基 :"*培養(yǎng)基有售,用我們乾思生物的*培養(yǎng)基,,細胞培養(yǎng)更省心!"
規(guī)格 :5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
供應商 :乾思生物
貨期 :7-10天
BEL-7404(人肝癌細胞)實驗事項:
1. 加樣:加樣或加試劑時,,請注意在吸取標本 / 標準品,,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,,將會導致不同的“預孵育"時間,,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,,如標本數(shù)量多,,推薦使用多道移液器加樣。
2 孵育:為防止樣品蒸發(fā),,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā),;洗板后應盡快進行下步操作,,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度,。
3. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,,同時要消除板底殘留的液體和手指印,,避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
◇ 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。收集上清。如有沉淀形成,,應再次離心,。
◇ 血漿:
應根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。如有沉淀形成,,應再次離心。
◇ 尿液,、胸腹水,、腦脊液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成,應再次離心,。
◇ 細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,,以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心。
◇ 組織標本:
切割標本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin。用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存,如有必要,,可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,。