產(chǎn)品名稱:293(HEK-293)(人胚腎細胞)

貨號 :SX-C0004

培養(yǎng)基 :"*培養(yǎng)基有售

用我們乾思生物的*培養(yǎng)基,，細胞培養(yǎng)更省心,！"

規(guī)格 :5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

供應(yīng)商 :乾思生物

貨期 :7-10天

注：293（HEK-293）（人胚腎細胞）洗板方法

◇      注意事項：

收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當天進行檢測的標本,，儲存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集標本,，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融,。標本2-8℃可保存48小時,，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月,。部分標本需添加抑tai酶,。

◇      液體類標本

標本必須為液體，不含沉淀,。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類,。

◇      血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清,。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。

◇      血漿：

應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。

◇      尿液,、胸腹水,、腦脊液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。

◇      細胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。

◇      組織標本：

切割標本后，稱取重量,。加入一定量的PBS,，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin。用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用,。

寄標本時需注明以下情況：

標本編號,；2,、所測項目；3,、是否做復孔,；3、實驗后標本是否寄回

1.  手工洗板方法：吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),，浸泡1-2分鐘,，根據(jù)需要，重復此過程數(shù)次,。

2.  自動洗板：如果有自動洗板機,，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

計算

 以標準物的濃度為縱坐標(對數(shù)坐標),，OD值為橫坐標(對數(shù)坐標),，在對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進行分析,，如curve expert 1.3,，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度，再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度,。