人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA Kit

人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA Kit標本必須為液體,，不含沉淀。包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類,。

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供應(yīng)商 :拜力生物

貨期 :7-10天

產(chǎn)品包括ELISA試劑盒和ELISA實驗，生物試劑和化學試劑,，抗體,，細胞，血清,，培養(yǎng)基,、儀器、耗材,、生化,、免疫及細胞培養(yǎng)試劑等,，廣泛應(yīng)用于生命科學基礎(chǔ)研究,、生物制藥、疾病診斷與控制,、檢驗檢疫,、食品衛(wèi)生等諸多領(lǐng)域?？蛻羯婕按髮Ｔ盒?、研究機構(gòu)、醫(yī)院,、衛(wèi)生防疫,、商品檢驗檢疫、生物制藥公司,、食品企業(yè)等,。

1.  試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑,。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,，避免交叉污染。

2.   加樣：加樣或加試劑時,，請注意在吸取標本 / 標準品,，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,，將會導致不同的 “預(yù)孵育"時間,，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多,，推薦使用多道移液器加樣,。

3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),，酶標板加上蓋或覆膜,，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進行下步操作,，任何時侯都應(yīng)避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴格遵守給定的孵育時間和溫度,。

4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,，同時要消除板底殘留的液體和手指印,，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。

5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。標準品、檢測溶液A工作液,、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆,。請確配置標準品及工作液,，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl),，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差,；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液,。

6.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,，每隔10分鐘)，如顏色較深,，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),，避免反應(yīng)過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。

7.  底物：底物請避光保存,，在儲存和溫育時避免強光直接照射,。

   建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性,。

   如標本中待測物質(zhì)含量過高,，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù),。

◇      液體類標本

標本必須為液體,，不含沉淀,。包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類,。

◇      血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。

◇      血漿：

應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。

◇      尿液,、胸腹水,、腦脊液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。

◇      細胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。

現(xiàn)在一般完整的試劑盒應(yīng)該有一下幾個組成：

（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）,；

（2）酶標記的抗原或抗體（結(jié)合物）；

（3）酶的底物,；

（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中）,，參考標準品和控制血清（定量測定中）；

（5）結(jié)合物及標本的稀釋液,；

（6）洗滌液,，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水,；

（7）酶反應(yīng)終止液,，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的體積而異,，在板式ELISA中一般采用3mol/L,。