產(chǎn)品名稱(chēng):BEL-7404(人肝癌細(xì)胞)
貨號(hào) :SX-C0073
培養(yǎng)基 :"*培養(yǎng)基有售,用我們拜力生物的*培養(yǎng)基,,細(xì)胞培養(yǎng)更省心,!"
規(guī)格 :5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
供應(yīng)商 :拜力生物
貨期 :7-10天
BEL-7404(人肝癌細(xì)胞)實(shí)驗(yàn)事項(xiàng):
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑,。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時(shí),,請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用多道移液器加樣。
建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù),。
洗板方法
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次,。
2. 自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為縱坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),,OD值為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),在對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),。推薦使用專(zhuān)業(yè)制作曲線(xiàn)軟件進(jìn)行分析,,如curve expert 1.3,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度,。
◇ 注意事項(xiàng):
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定,。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融,。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),,-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月,。部分標(biāo)本需添加抑tai酶,。
◇ 液體類(lèi)標(biāo)本
標(biāo)本必須為液體,不含沉淀,。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個(gè)標(biāo)本量收集體積=100ul×檢測(cè)種類(lèi),。