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麥康凱瓊脂培養(yǎng)基介紹
閱讀:455 發(fā)布時(shí)間:2025-5-7麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacConkey Agar,,MAC)全面解析
一,、基本介紹
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基是一種選擇性及鑒別性培養(yǎng)基,由Alfred Theodore MacConkey于1905年研制,,主要用于腸道致病菌的分離與鑒定,。其核心設(shè)計(jì)邏輯為:
選擇性抑制:通過(guò)膽鹽抑制革蘭氏陽(yáng)性菌(如葡萄球菌、鏈球菌),,但允許部分腸球菌及沙門氏菌生長(zhǎng),;
鑒別功能:利用乳糖發(fā)酵差異,通過(guò)指示劑顏色區(qū)分細(xì)菌代謝特性。
二,、核心成分與配方
成分 | 作用機(jī)制 |
---|---|
蛋白胨,、脙胨 | 提供碳源、氮源,、維生素及生長(zhǎng)因子,,支持細(xì)菌基礎(chǔ)代謝。 |
膽鹽(豬/牛/羊) | 抑制革蘭氏陽(yáng)性菌,,但對(duì)沙門氏菌,、志賀氏菌等腸道致病菌抑制較弱。 |
乳糖 | 作為發(fā)酵底物,,分解產(chǎn)酸(如大腸埃希菌)或不分解(如沙門氏菌),。 |
中性紅 | pH指示劑,發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸時(shí)菌落呈桃紅色,,并形成膽鹽沉淀環(huán),。 |
結(jié)晶紫 | 增強(qiáng)對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌(如腸球菌、葡萄球菌)的抑制,,減少干擾。 |
氯化鈉 | 維持滲透壓平衡,,確保細(xì)菌正常生長(zhǎng),。 |
瓊脂 | 凝固劑,形成固體培養(yǎng)基表面,。 |
典型配方(每升):
蛋白胨 20g,、乳糖 10g、氯化鈉 5g,、膽鹽 5g,、中性紅 0.03g、瓊脂 14g,,pH 7.2±0.2,。
三、作用機(jī)制與鑒別原理
選擇性抑制:
膽鹽破壞革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞膜,,抑制其生長(zhǎng),;
結(jié)晶紫進(jìn)一步增強(qiáng)對(duì)腸球菌和葡萄球菌的抑制,但沙門氏菌等腸道菌可耐受,。
乳糖發(fā)酵鑒別:
發(fā)酵乳糖菌(如大腸埃希菌):產(chǎn)酸使菌落呈桃紅色,,周圍形成膽鹽沉淀環(huán)(因酸與膽鹽反應(yīng))。
不發(fā)酵乳糖菌(如沙門氏菌,、志賀氏菌):菌落無(wú)色或淡黃色,,無(wú)沉淀環(huán)。
遲緩發(fā)酵菌(如宋內(nèi)志賀氏菌):菌落中心偏紅,邊緣無(wú)色,。
四,、應(yīng)用場(chǎng)景
臨床檢驗(yàn):
糞便、分泌物中腸道致病菌(沙門氏菌,、志賀氏菌,、致瀉性大腸桿菌)的分離;
腸球菌的篩選與鑒定,。
科研應(yīng)用:
耐藥菌株篩選(如添加壯觀霉素篩選鴨源沙門氏菌),;
菌株融合研究(如通過(guò)抗藥性標(biāo)記篩選融合菌株)。
特殊改良配方:
低鹽MAC:減少氯化鈉以抑制變形桿菌蔓延生長(zhǎng),;
山梨醇MAC:替換乳糖用于分離O157大腸埃希氏菌(不發(fā)酵山梨醇),;
含抗生素MAC:添加氨芐青霉素、多粘菌素B等篩選特定耐藥菌,。
五,、制備方法
配制:
稱取54g培養(yǎng)基干粉溶于1L蒸餾水,加熱煮沸至溶解,。
滅菌:
分裝后121℃高壓滅菌15分鐘,,滅菌后搖勻防止瓊脂沉積。
傾注平板:
冷卻至50-55℃時(shí)加入滅菌的結(jié)晶紫和中性紅溶液,,混勻后傾注平板,。
六、使用注意事項(xiàng)
樣本處理:
糞便,、分泌物等可直接接種,,固體樣本需稀釋后涂布。
培養(yǎng)條件:
35-37℃培養(yǎng)18-24小時(shí),,觀察菌落顏色與形態(tài),。
結(jié)果解讀:
結(jié)合生化試驗(yàn)(如吲哚試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn))和血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)一步鑒定,。
局限性:
某些特殊需求菌株(如嚴(yán)格厭氧菌)可能無(wú)法生長(zhǎng),;
需定期驗(yàn)證培養(yǎng)基性能(如接種大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌驗(yàn)證選擇性)。
七,、總結(jié)
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基通過(guò)膽鹽抑制與乳糖發(fā)酵指示,,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腸道致病菌的高效分離與鑒別。其成分可調(diào),、用途廣泛,,是臨床微生物檢驗(yàn)和科研中的工具。隨著研究深入,,改良配方不斷拓展其應(yīng)用場(chǎng)景,,為微生物學(xué)研究提供了有力支持,。