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瓊脂培養(yǎng)基：微生物學(xué)中的基礎(chǔ)工具
閱讀：1602 發(fā)布時間：2024-8-16瓊脂培養(yǎng)基,，作為微生物學(xué)實驗中的基礎(chǔ)工具,，以其的物理和化學(xué)性質(zhì)，在細(xì)菌培養(yǎng),、鑒定,、分離及保存等方面發(fā)揮著重要作用。本文將從瓊脂培養(yǎng)基的定義,、制備,、使用及保存等方面進行詳細(xì)闡述。
一,、瓊脂培養(yǎng)基的定義
瓊脂培養(yǎng)基,，英文名稱為agar-based medium,，是2019年公布的結(jié)核病學(xué)名詞。它是以瓊脂作為賦形劑的固體培養(yǎng)基,，通過瓊脂的凝固作用,，為微生物提供一個穩(wěn)定的生長環(huán)境。瓊脂粉一般為白色,、淡黃色或淡灰色粉末狀,，在冷水中不溶解，但加熱煮沸或高壓滅菌后可使瓊脂溶解,，冷卻后凝成固態(tài),。
二、瓊脂培養(yǎng)基的制備
瓊脂培養(yǎng)基的制備過程相對復(fù)雜,，但每一步都至關(guān)重要,。以下是制備瓊脂培養(yǎng)基的基本步驟：
準(zhǔn)備原料：根據(jù)實驗需求，稱取適量的瓊脂粉,、蛋白胨,、酵母浸粉、葡萄糖等原料,。
溶解混合：將原料加入適量的純化水中,，攪拌均勻，確保無團塊,。注意水溫不宜過高,，以免瓊脂表面吸水變硬。
調(diào)整pH值：使用酸堿溶液調(diào)整培養(yǎng)基的pH值至適宜范圍,，通常為7.0左右,。
加熱滅菌：將混合均勻的培養(yǎng)基進行高溫高壓滅菌處理，以殺滅其中的細(xì)菌和其他微生物,。滅菌條件一般為121°C,、15-20分鐘。
分裝凝固：將滅菌后的培養(yǎng)基分裝至試管或培養(yǎng)皿中,，待其冷卻凝固,。
三、瓊脂培養(yǎng)基的使用
瓊脂培養(yǎng)基在微生物學(xué)實驗中有著廣泛的應(yīng)用,。以下是其主要用途：
細(xì)菌培養(yǎng)：將待培養(yǎng)的菌種接種到瓊脂培養(yǎng)基上,，通過劃線、點菌或涂抹等方式,，使細(xì)菌在培養(yǎng)基上生長并形成菌落,。通過觀察菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征,，可以進一步鑒定和分離細(xì)菌,。
菌落計數(shù)：利用瓊脂培養(yǎng)基進行細(xì)菌計數(shù)，通過統(tǒng)計培養(yǎng)基上的菌落數(shù)量,，可以評估樣品中細(xì)菌的含量,。
菌種保存：瓊脂培養(yǎng)基還可以用于菌種的長期保存。通過調(diào)整瓊脂的添加量,，可以制備出適合菌種保存的半固體培養(yǎng)基,。
四、瓊脂培養(yǎng)基的保存
瓊脂培養(yǎng)基的保存對于保持其質(zhì)量和延長使用壽命至關(guān)重要,。以下是保存瓊脂培養(yǎng)基的注意事項：
保存溫度：購買的一次性細(xì)菌培養(yǎng)平板一般應(yīng)放置在4℃冰箱中保存,，但也有文獻指出，室溫保存可能更有利于細(xì)菌培養(yǎng)基,。然而,，對于已經(jīng)開啟包裝或自制的培養(yǎng)基，應(yīng)盡量避免長時間室溫保存,，以防細(xì)菌污染,。
保存時間：保存時間與平板的密封程度、培養(yǎng)基厚度,、冰箱環(huán)境等因素有關(guān)。購買的一次性培養(yǎng)基通常有包裝袋密封,，保存時間可達1個月至6個月不等,。而已經(jīng)開啟包裝或自制的培養(yǎng)基,，保存時間較短，一般不宜超過半個月,。
存放方式：培養(yǎng)基應(yīng)倒置存放，避免冷凝水珠滴落到培養(yǎng)基上,。同時,，應(yīng)將培養(yǎng)基放置在遠(yuǎn)離風(fēng)扇、細(xì)菌培養(yǎng)物,、水汽循環(huán)的冰箱部位,，以防水分蒸發(fā)和霉菌生長。
觀察與檢查：在使用前,，應(yīng)仔細(xì)觀察培養(yǎng)基是否干裂,、污染雜菌。如有異常,，應(yīng)及時處理并更換新的培養(yǎng)基,。
五、結(jié)論
瓊脂培養(yǎng)基作為微生物學(xué)實驗中的基礎(chǔ)工具，其制備,、使用及保存都需嚴(yán)格遵守相關(guān)操作規(guī)程,。通過科學(xué)合理的制備和保存方法，可以確保瓊脂培養(yǎng)基的質(zhì)量和穩(wěn)定性,，為微生物學(xué)實驗提供可靠的支持,。