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默克的液相色譜柱要如何選
閱讀：819 發(fā)布時(shí)間：2024-1-5在選擇色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì),，他們的類型結(jié)構(gòu),、極性、酸堿性,、分子量大小等等,，
1.樣品是極性的且弱酸性的；就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測(cè),，即要選擇承受100%純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱
2.如果樣品極性太強(qiáng),，或酸性太強(qiáng)；可以選擇CN,，NH2,，或硅膠柱，HILIC（親水色譜）,，也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱（缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng),，對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),，另外離子對(duì)試劑很難洗下來(lái),，基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn)）
3.若樣品是堿性的；可選擇高純硅膠柱（高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),，且硅膠端基封尾）或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱（如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等）,，他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾，一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,，因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留
4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng),，或堿性太強(qiáng)；可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(cè)（優(yōu)點(diǎn)是方法開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單,，缺點(diǎn)是目前實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,，價(jià)格也高）或者選用HILIC色譜柱（硅膠柱在反相條件下使用，這也是很經(jīng)典的檢測(cè)堿性樣品的方法）選擇強(qiáng)離子交換柱（缺點(diǎn)是不能用來(lái)分析其它樣品,，對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,，否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)）也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。
影響因素
A:物理因素1.硅膠純度----·填料硅膠的純度與殘留金屬離子濃度
2.色譜柱尺寸---填料床的長(zhǎng)度和內(nèi)徑
3.顆粒形狀------球型或不規(guī)則型
4.粒徑------------平均顆粒直徑,通常3-10µm
5.表面積---------顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,以m2/gram表示
6.孔徑------------顆粒的孔或腔的平均尺寸,范圍80-300Å