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技術(shù)文章

教你如何使用和維護默克色譜柱

閱讀:1081          發(fā)布時間:2023-6-28

  默克色譜柱沒有特殊說明,,它是評估報告中顯示的流動相,使用前,,請務(wù)必注意液相色譜柱的存儲溶液是否與要分析的樣品的流動相混溶,。在反相色譜中,如果使用高濃度鹽或緩沖液作為洗脫液,,則應(yīng)使用約10%的低濃度有機相洗脫液進行過渡,,否則緩沖液中的鹽將處于高濃度有機相。容易沉淀和阻塞色譜柱,。

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  在默克色譜柱運行期間,,需要注意以下事項以維護色譜柱。


 ?。?)裝卸,,更換色譜柱時,其運動應(yīng)輕巧,,并且接頭應(yīng)適當擰緊,。必須避免強烈的機械振動,以免在柱床中產(chǎn)生空隙,。


 ?。?)如果將儀器用于常規(guī)分析并且樣品類型有限,但分析數(shù)量很多,,則可能希望為每種常規(guī)分析配置一個列,,這將有助于延長使用壽命列的。


 ?。?)避免壓力和溫度的突然變化以及任何機械振動,。


  溫度突然變化或色譜柱從高處掉落會影響色譜柱的填充條件;色譜柱壓力的突然升高或降低也會沖擊色譜柱中的填料,,因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)緩慢進行,。在進樣過程中,請勿將閥門旋轉(zhuǎn)太慢,。


 ?。?)溶劑的組成應(yīng)逐漸改變,尤其是在反相色譜法中,,不應(yīng)將其從有機溶劑直接改變?yōu)樗兴?,反之亦然?/span>


  (5)當使用色譜柱溫度控制裝置時,,應(yīng)注意的是,,只有在流動相通過后才能升高溫度。


 ?。?)一般來說,,默克色譜柱不能反吹。僅當制造商指示可以反吹色譜柱時,,反吹才能清除殘留在色譜柱頭上的雜質(zhì),。否則,,反沖會迅速降低色譜柱效率。


 ?。?)選擇適當?shù)牧鲃酉?,避免損壞固定相。有時可以在采樣器的前面連接一個預(yù)柱,。當分析柱是鍵合硅膠時,,預(yù)柱是硅膠,因此在進入分析柱之前,,流動相可以用硅膠“飽和",,以防止分析柱中的二氧化硅基質(zhì)溶解。


 ?。?)避免將具有復(fù)雜基質(zhì)的樣品(尤其是生物樣品)直接注入色譜柱中,。必須對樣品進行預(yù)處理或在進樣器和色譜柱之間連接保護柱。保護柱通常是填充有相似固定相的短柱,,保護柱可以并且應(yīng)該經(jīng)常更換,。


  (9)經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱,,以除去殘留在色譜柱中的雜質(zhì),。清潔時,應(yīng)使用可混溶的溶劑替換流路系統(tǒng)中的流動相,。逐漸地,,每個流動相的體積應(yīng)約為色譜柱體積的20倍,也就是說,,常規(guī)分析需要50-75mL,。


  (10)存放色譜柱時,,用乙腈或甲醇填充色譜柱,,并擰緊色譜柱接頭,以防止溶劑蒸發(fā)和干燥,。不要將緩沖溶液在柱子中放置過夜或更長時間,。


  (11)在使用過程中,,如果壓力升高,,則可能是燒結(jié)過濾器堵塞。此時,,應(yīng)更換過濾器或?qū)⑵淙〕鲞M行清潔,。二是大分子進入色譜柱,導(dǎo)致色譜柱頭被污染,。如果降低柱效或色譜峰變形,,則柱頭可能塌陷,,死體積增加。


 ?。?2)完成分離和分析后,,不應(yīng)立即關(guān)閉色譜分析系統(tǒng),并應(yīng)及時沖洗色譜分析系統(tǒng),,通常要超過0.5h,以除去色譜柱中的雜質(zhì),。


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