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高效液相色譜出現(xiàn)雙峰的原因
閱讀：2025 發(fā)布時(shí)間：2023-6-9明明實(shí)驗(yàn)時(shí)只分析一種物質(zhì),，為什么峰圖會出現(xiàn)雙峰呢,？通常情況下，正確的峰型應(yīng)該是尖銳而對稱的,，出現(xiàn)雙峰應(yīng)該是實(shí)驗(yàn)過程中有錯(cuò)誤的步驟導(dǎo)致的。液相色譜出現(xiàn)“雙峰"的原因有很多,。一般有以下幾種原因：色譜柱,、溶劑、進(jìn)樣量,、樣品特性和pH值,。恒譜生簡單介紹其中色譜柱、溶劑因素導(dǎo)致出現(xiàn)雙峰及解決辦法,。
色譜柱：
如何判斷是色譜柱出現(xiàn)問題導(dǎo)致雙峰出現(xiàn)呢,？操作人員分析單一純物時(shí)，如果每個(gè)色譜峰都出現(xiàn)雙峰,，可以確定是色譜柱頭受損或者是柱頭污染了,。如果是色譜柱正常，進(jìn)樣量少并且色譜峰形為一大峰帶一小峰,，不一定拖尾,，這種情況可能是柱頭受堵,?？梢詫⑸V柱反過來接，用流動相或其它溶劑沖洗掉堵在柱頭的殘留物,，然后再反過來,，一般都能解決。如果反復(fù)還是不能解決問題,，可能是柱頭塌陷的問題,。液相色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達(dá)2年以上，但是柱子使用一段時(shí)間后,，可能有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)保留于柱頂造成柱頭塌陷,，這時(shí)可補(bǔ)加填料使柱效恢復(fù)。每次使用完色譜柱后,，需用洗脫能力強(qiáng)的洗脫液沖洗,，以延長色譜分析柱的壽命。
色譜柱頭塌陷的原因有很多,，比較常見的是色譜泵壓力過高,，填料壓碎產(chǎn)生空隙。除此之外還有諸如裝填時(shí)壓力過低，不密實(shí),；流動相溶解填料,，造成空隙；色譜柱入口篩板堵塞等原因,。色譜篩板能有效地?cái)r截樣品,、流動相或管線及密封件的顆粒物對色譜柱的污染，保護(hù)色譜柱和儀器,。篩板使用一段時(shí)間后,，攔截的污染物會堵塞篩板，因此需要定期更換,。但是相較于損壞色譜柱,，更換一個(gè)篩板顯得性價(jià)比更高，成本更低廉,。
溶劑問題：
反相色譜流動相多為甲醇,、乙腈、水,，實(shí)驗(yàn)中往往會從中加各種添加劑以改善分離性能,。有時(shí)候?yàn)榱藰悠返娜芙庑曰蚍€(wěn)定性加入了一點(diǎn)的緩沖液，但是緩沖液的酸堿性可能會導(dǎo)致樣品轉(zhuǎn)化,，從而產(chǎn)生雙峰現(xiàn)象,。可以更換緩沖液或者更換流動相試一試,。
影響雙峰出現(xiàn)的原因還有很多,，比如樣品超過柱載量，從而導(dǎo)致二次分配,；儀器間隔記錄時(shí)間太短都有可能造成雙峰出現(xiàn),，因此具體情況要具體分析。