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高效液相色譜出現(xiàn)雙峰的原因

閱讀:2031          發(fā)布時間:2023-6-9

明明實驗時只分析一種物質,,為什么峰圖會出現(xiàn)雙峰呢,?通常情況下,正確的峰型應該是尖銳而對稱的,,出現(xiàn)雙峰應該是實驗過程中有錯誤的步驟導致的,。液相色譜出現(xiàn)“雙峰"的原因有很多。一般有以下幾種原因:色譜柱、溶劑,、進樣量,、樣品特性和pH值。恒譜生簡單介紹其中色譜柱,、溶劑因素導致出現(xiàn)雙峰及解決辦法,。

賽默飛色譜柱使用注意事項(1)

色譜柱:

如何判斷是色譜柱出現(xiàn)問題導致雙峰出現(xiàn)呢?操作人員分析單一純物時,,如果每個色譜峰都出現(xiàn)雙峰,,可以確定是色譜柱頭受損或者是柱頭污染了。如果是色譜柱正常,,進樣量少并且色譜峰形為一大峰帶一小峰,,不一定拖尾,,這種情況可能是柱頭受堵,。可以將色譜柱反過來接,,用流動相或其它溶劑沖洗掉堵在柱頭的殘留物,,然后再反過來,一般都能解決,。如果反復還是不能解決問題,,可能是柱頭塌陷的問題。液相色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上,,但是柱子使用一段時間后,,可能有一些吸附作用強的物質保留于柱頂造成柱頭塌陷,這時可補加填料使柱效恢復,。每次使用完色譜柱后,,需用洗脫能力強的洗脫液沖洗,以延長色譜分析柱的壽命,。

色譜柱頭塌陷的原因有很多,,比較常見的是色譜泵壓力過高,填料壓碎產生空隙,。除此之外還有諸如裝填時壓力過低,,不密實;流動相溶解填料,,造成空隙,;色譜柱入口篩板堵塞等原因。色譜篩板能有效地攔截樣品,、流動相或管線及密封件的顆粒物對色譜柱的污染,,保護色譜柱和儀器。篩板使用一段時間后,攔截的污染物會堵塞篩板,,因此需要定期更換,。但是相較于損壞色譜柱,更換一個篩板顯得性價比更高,,成本更低廉,。

溶劑問題:

反相色譜流動相多為甲醇、乙腈,、水,,實驗中往往會從中加各種添加劑以改善分離性能。有時候為了樣品的溶解性或穩(wěn)定性加入了一點的緩沖液,,但是緩沖液的酸堿性可能會導致樣品轉化,,從而產生雙峰現(xiàn)象??梢愿鼡Q緩沖液或者更換流動相試一試,。

影響雙峰出現(xiàn)的原因還有很多,比如樣品超過柱載量,,從而導致二次分配,;儀器間隔記錄時間太短都有可能造成雙峰出現(xiàn),因此具體情況要具體分析,。


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