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斜面培養(yǎng)基的制作方法
閱讀：3516 發(fā)布時(shí)間：2022-11-17 有一種簡(jiǎn)捷快速制備斜面培養(yǎng)基的方法,，現(xiàn)介紹如下：
制作培養(yǎng)基斜面,，傳統(tǒng)的方法是將試管每10支為一組扎成一捆,，高壓滅菌后，一支一支地?cái)[成斜面,，操作比較煩瑣,，占用面積又多，造成諸多不便,。
1,、將膠合板截成長(zhǎng)18厘米(與試管長(zhǎng)度相等或略短)、寬9厘米(比并排5支試管直徑的總和略窄)的小塊備用,。
2,、在并排5支試管上面平置截好的膠合板，再在膠合板上面并排放5支試管,，然后將試管的上,、下端分別用牛皮紙包好，用線扎緊,，使膠合板兩側(cè)的試管保持平行,，置高壓鍋中滅菌。
3,、高壓滅菌后,，經(jīng)自然冷卻，待氣壓降至零時(shí),，將高壓鍋的鍋蓋打開點(diǎn),，當(dāng)棉塞水分充分蒸發(fā)后取出，不用拆捆,，直接擺成斜面,。大量制斜面時(shí)，既快捷又很少占用空間,，非常方便,，還便于保溫，減緩凝結(jié)速度,，充分吸收游離水分,。
4、如需將斜面培養(yǎng)基保存一段時(shí)間,，可在滅菌前將聚丙烯塑料袋套在試管外并扎緊袋口,，滅菌后取出，直接擺成斜面,，可防止水分蒸發(fā),。
1、配制溶液
向容器內(nèi)加入所需水量的一部分,，按照培養(yǎng)基的配方,，稱取各種原料，依次加入使其溶解,，最后補(bǔ)足所需水分,。對(duì)蛋白胨、肉膏等物質(zhì),，需加熱溶解,，加熱過程所蒸發(fā)的水分，應(yīng)在全部原料溶解后加水補(bǔ)足,。
配制固體培養(yǎng)基時(shí),，先將上述已配好的液體培養(yǎng)基煮沸，再將稱好的瓊脂加入,，繼續(xù)加熱至完/全融化,。并不斷攪拌，以免瓊脂糊底燒焦,。
2,、調(diào)節(jié)pH值
用pH試紙（或pH電位計(jì)、氫離子濃度比色計(jì)）測(cè)試培養(yǎng)基的pH值,，如不符合需要,，可用10%HCl或10%NaOH進(jìn)行調(diào)節(jié)，直到調(diào)節(jié)到配方要求的pH值為止,。
3,、過濾
用濾紙,、紗布或棉花趁熱將已配好的培養(yǎng)基過濾。用紗布過濾時(shí),，最好折疊成六層,，用濾紙過濾時(shí)，可將濾紙折疊成瓦棱形,，鋪在漏斗上過濾,。
4、分裝
已過濾的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行分裝,。如果要制作斜面培養(yǎng)基,，須將培養(yǎng)基分裝于試管中。如果要制作平板培養(yǎng)基或液體,、半固體培養(yǎng)基,，則須將培養(yǎng)基分裝于錐形瓶?jī)?nèi)。
分裝時(shí),，一手捏松彈簧夾,，使培養(yǎng)基流出，另一只手握住幾支試管或錐形瓶,，依次接取培養(yǎng)基,。分裝時(shí)，注意不要使培養(yǎng)基粘附管口或瓶口,，以免浸濕棉塞引起雜菌污染,。
裝入試管的培養(yǎng)基量，視試管和錐形瓶的大小及需要而定,。一般制作斜面培養(yǎng)基時(shí),，每只15×150毫米的試管，約裝3～4毫升（1/4～1/3試管高度）,，如制作深層培養(yǎng)基,，每只20×220毫米的試管約裝12～15毫升。每只錐形瓶裝入的培養(yǎng)基,，一般以其容積的一半為宜,。
5、加棉塞
分裝完畢后,，需要用棉塞堵住管口或瓶口,。堵棉塞的主要目的是過濾空氣，避免污染,。棉塞應(yīng)采用普通新鮮,、干燥的棉花制作，不要用脫脂棉，以免因脫脂棉吸水使棉塞無(wú)法使用,。制作棉塞時(shí),，要根據(jù)棉塞大小將棉花鋪展成適當(dāng)厚度，揪取手掌心大小一塊,，鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,，用右手食指插入棉花中部，同時(shí)左手食指與拇指稍稍緊握,，就會(huì)形成1個(gè)長(zhǎng)棒形的棉塞。棉塞作成后,，應(yīng)迅速塞入管口或瓶口中,，棉塞應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙，以防空氣中微生物沿皺折侵入,。棉塞不要過緊過松,，塞好后，以手提棉塞,、管,、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應(yīng)在管內(nèi)或瓶?jī)?nèi),，上端露出少許棉花便于拔取,。塞好棉塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上厚紙用繩捆札，準(zhǔn)備滅菌,。
6,、制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基
培養(yǎng)基滅菌后，如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基,，須趁培養(yǎng)基未凝固時(shí)進(jìn)行,。
(1)制作斜面培養(yǎng)基。在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上放1支長(zhǎng)0.5～1米左右的木條,，厚度為1厘米左右,。將試管頭部枕在木條上，使管內(nèi)培養(yǎng)基自然傾斜,，凝固后即成斜面培養(yǎng)基,。
(2)制作平板培養(yǎng)基。將剛剛滅過菌的盛有培養(yǎng)基的錐形瓶和培養(yǎng)皿放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,，點(diǎn)燃酒精燈,，右手托起錐形瓶瓶底，左手拔下棉塞,，將瓶口在酒精燈上稍加灼燒,，左手打開培養(yǎng)皿蓋，右手迅速將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,，每皿約倒入10毫升,，以鋪滿皿底為度,。鋪放培養(yǎng)基后放置15分鐘左右，待培養(yǎng)基凝固后,，再5個(gè)培養(yǎng)皿一疊,，倒置過來，平放在恒溫箱里,，24小時(shí)后檢查,，如培養(yǎng)基末長(zhǎng)雜菌，即可用來培養(yǎng)微生物,。