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斜面培養(yǎng)基的制作方法
閱讀：3521 發(fā)布時間：2022-11-17 有一種簡捷快速制備斜面培養(yǎng)基的方法,，現(xiàn)介紹如下：
制作培養(yǎng)基斜面,，傳統(tǒng)的方法是將試管每10支為一組扎成一捆，高壓滅菌后,，一支一支地擺成斜面,，操作比較煩瑣，占用面積又多,，造成諸多不便,。
1、將膠合板截成長18厘米(與試管長度相等或略短),、寬9厘米(比并排5支試管直徑的總和略窄)的小塊備用,。
2、在并排5支試管上面平置截好的膠合板,，再在膠合板上面并排放5支試管,，然后將試管的上、下端分別用牛皮紙包好,，用線扎緊,，使膠合板兩側的試管保持平行，置高壓鍋中滅菌,。
3,、高壓滅菌后，經(jīng)自然冷卻,，待氣壓降至零時,，將高壓鍋的鍋蓋打開點，當棉塞水分充分蒸發(fā)后取出,，不用拆捆,，直接擺成斜面。大量制斜面時,，既快捷又很少占用空間,，非常方便，還便于保溫,，減緩凝結速度,，充分吸收游離水分。
4,、如需將斜面培養(yǎng)基保存一段時間,，可在滅菌前將聚丙烯塑料袋套在試管外并扎緊袋口,，滅菌后取出，直接擺成斜面,，可防止水分蒸發(fā),。
1、配制溶液
向容器內加入所需水量的一部分,，按照培養(yǎng)基的配方，稱取各種原料,，依次加入使其溶解,，最后補足所需水分。對蛋白胨,、肉膏等物質,，需加熱溶解，加熱過程所蒸發(fā)的水分,，應在全部原料溶解后加水補足,。
配制固體培養(yǎng)基時，先將上述已配好的液體培養(yǎng)基煮沸,，再將稱好的瓊脂加入,，繼續(xù)加熱至完/全融化。并不斷攪拌,，以免瓊脂糊底燒焦,。
2、調節(jié)pH值
用pH試紙（或pH電位計,、氫離子濃度比色計）測試培養(yǎng)基的pH值,，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH進行調節(jié),，直到調節(jié)到配方要求的pH值為止,。
3、過濾
用濾紙,、紗布或棉花趁熱將已配好的培養(yǎng)基過濾,。用紗布過濾時，最好折疊成六層,，用濾紙過濾時,，可將濾紙折疊成瓦棱形，鋪在漏斗上過濾,。
4,、分裝
已過濾的培養(yǎng)基應進行分裝。如果要制作斜面培養(yǎng)基,，須將培養(yǎng)基分裝于試管中,。如果要制作平板培養(yǎng)基或液體,、半固體培養(yǎng)基，則須將培養(yǎng)基分裝于錐形瓶內,。
分裝時,，一手捏松彈簧夾，使培養(yǎng)基流出,，另一只手握住幾支試管或錐形瓶,，依次接取培養(yǎng)基。分裝時,，注意不要使培養(yǎng)基粘附管口或瓶口,，以免浸濕棉塞引起雜菌污染。
裝入試管的培養(yǎng)基量,，視試管和錐形瓶的大小及需要而定,。一般制作斜面培養(yǎng)基時，每只15×150毫米的試管,，約裝3～4毫升（1/4～1/3試管高度）,，如制作深層培養(yǎng)基，每只20×220毫米的試管約裝12～15毫升,。每只錐形瓶裝入的培養(yǎng)基,，一般以其容積的一半為宜。
5,、加棉塞
分裝完畢后,，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣,，避免污染,。棉塞應采用普通新鮮、干燥的棉花制作,，不要用脫脂棉,，以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。制作棉塞時,，要根據(jù)棉塞大小將棉花鋪展成適當厚度,，揪取手掌心大小一塊，鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,，用右手食指插入棉花中部,，同時左手食指與拇指稍稍緊握，就會形成1個長棒形的棉塞,。棉塞作成后,，應迅速塞入管口或瓶口中，棉塞應緊貼內壁不留縫隙,，以防空氣中微生物沿皺折侵入,。棉塞不要過緊過松,，塞好后，以手提棉塞,、管,、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應在管內或瓶內,，上端露出少許棉花便于拔取,。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆札，準備滅菌,。
6,、制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基
培養(yǎng)基滅菌后，如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基,，須趁培養(yǎng)基未凝固時進行。
(1)制作斜面培養(yǎng)基,。在實驗臺上放1支長0.5～1米左右的木條,，厚度為1厘米左右。將試管頭部枕在木條上,，使管內培養(yǎng)基自然傾斜,，凝固后即成斜面培養(yǎng)基。
(2)制作平板培養(yǎng)基,。將剛剛滅過菌的盛有培養(yǎng)基的錐形瓶和培養(yǎng)皿放在實驗臺上,，點燃酒精燈，右手托起錐形瓶瓶底,，左手拔下棉塞,，將瓶口在酒精燈上稍加灼燒，左手打開培養(yǎng)皿蓋,，右手迅速將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,，每皿約倒入10毫升，以鋪滿皿底為度,。鋪放培養(yǎng)基后放置15分鐘左右,，待培養(yǎng)基凝固后，再5個培養(yǎng)皿一疊,，倒置過來,，平放在恒溫箱里，24小時后檢查,，如培養(yǎng)基末長雜菌,，即可用來培養(yǎng)微生物。