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實(shí)驗(yàn)室微生物檢測(cè)無(wú)菌取樣的操作
閱讀：1585 發(fā)布時(shí)間：2022-8-29無(wú)菌取樣抽樣操作是整個(gè)實(shí)驗(yàn)室微生物檢測(cè)流程的第一步，也是首先應(yīng)當(dāng)保證的重要環(huán)節(jié),。經(jīng)常會(huì)有這樣的情況：樣品檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)異常,，我們排查了微生物檢測(cè)流程的方方面面都沒有出現(xiàn)偏差，結(jié)果是樣品在抽樣時(shí)已經(jīng)被污染,。這樣的情況事實(shí)上并不鮮見,，如何杜絕呢？還得從規(guī)范抽樣操作開始,。由于不同類型的樣品應(yīng)采取不同的抽樣操作,，為了使抽樣更加科學(xué)，下面針對(duì)不同樣品的抽樣操作進(jìn)行分類闡述,。
液體樣品
一般情況下,，液體樣品比較容易獲得代表性樣品。液態(tài)食品一般盛放在大罐中,，取樣時(shí)可連續(xù)或間歇攪拌,。對(duì)于較小的容器，可在取樣前將液體上下顛倒,，使其*混勻,。取得的樣品應(yīng)放在已滅菌的容器中送往實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室在取樣檢測(cè)之前應(yīng)當(dāng)把液體再*混勻一次,。
固體樣品
根據(jù)所取樣品材料的不同,，所使用的的工具也不同。固態(tài)樣品常用的取樣工具有解剖刀,、勺子,、軟木鉆、鋸,、鉗子等,，使用前均須滅菌。例如面粉或奶粉等已經(jīng)混勻的食品,，其成分質(zhì)量均勻穩(wěn)定,，可以抽取少量樣品檢測(cè)。但散裝樣品就必須從多個(gè)點(diǎn)取樣,，且每個(gè)點(diǎn)都要單獨(dú)處理,，在檢測(cè)前要*混勻,。肉類、魚類或類似食品既要在表皮取樣,，又要在深層取樣,，深層取樣時(shí)要小心不要被表面污染。有些食品,，如新鮮肉類或熟肉可用滅菌的解剖刀和鉗子取樣,；冷凍食品在不解凍的狀態(tài)下用鋸、木鉆或電鉆,，一般斜角鉆入來(lái)獲得深層樣品,；粉末狀樣品取樣時(shí)，可用滅菌的取樣器斜角插入箱底,，樣品填滿取樣器后提出箱外,，再用滅菌勺從取樣器的上、中,、下部位采樣,。
水樣
取水樣時(shí)，最好選用帶有防塵磨口瓶塞的廣口瓶,。對(duì)于氯氣處理過的水,，取樣后在100mL水樣中加入0.1mL的2%的硫代硫酸鈉溶液。取樣時(shí)應(yīng)特別注意防止樣品的污染,，樣品應(yīng)*地充滿取樣瓶,。如果樣品時(shí)從水龍頭上取得，龍頭嘴的里外都應(yīng)擦干凈,。打開水龍頭讓水流幾分鐘,，關(guān)上水龍頭并用酒精燈灼燒，再次打開水龍頭讓水流1-2min后再接樣并裝滿取樣瓶,。這樣的取樣方法能確保供供水系統(tǒng)的細(xì)菌學(xué)分析的質(zhì)量,，但如果微生物檢測(cè)的目的是用于追蹤微生物的污染源建議還應(yīng)在水龍頭滅菌前取樣會(huì)在龍頭的里外用棉拭子涂抹取樣，以檢測(cè)水龍頭自身污染的可能性,。從水庫(kù),、池塘、井水,、河流等取水樣時(shí),，用無(wú)菌的器械或工具拿取瓶子和打開瓶塞，在流動(dòng)水中取樣品是瓶嘴應(yīng)直接對(duì)著水流,。大多數(shù)國(guó)家的取樣程序中已明確規(guī)定了取樣所用器械,，如果不具備適當(dāng)?shù)娜觾x器或臨時(shí)取樣工具，只能用手操作，但取樣時(shí),，應(yīng)特別小心,，防止用手接觸水樣或取樣瓶?jī)?nèi)部。
帶包裝食品
直接食用的小包裝食品盡可能取原包裝,，直到檢測(cè)前不要開封防止污染,；桶裝或者大容器包裝的液體或固體食品應(yīng)用無(wú)菌取樣器由幾個(gè)不同部位采取,，一起放入一個(gè)滅菌容器內(nèi),，不要過度潮濕，以防食品中固有的細(xì)菌繁殖,；對(duì)于桶裝或大容量包裝的冷凍食品,，應(yīng)從幾個(gè)不同的部位用滅菌工具抽樣，使之有充分的代表性,，將樣品送達(dá)實(shí)驗(yàn)室前,，要始終保持樣品處于冷凍狀態(tài)。若樣品一旦融化,，不可使其再冷凍,，保持冷卻即可。
表面采樣
通過惰性載體可以將表面樣品上的微生物轉(zhuǎn)移到合適的培養(yǎng)基中進(jìn)行微生物檢測(cè),，這陣惰性載體既不能引起微生物的死亡,，也不應(yīng)使其增殖。這樣的載體包括清水,、拭子等,。要達(dá)到微生物既不死亡又不增殖很困難，因此取樣后應(yīng)當(dāng)盡快進(jìn)行檢測(cè),。表面取樣技術(shù)只能直接轉(zhuǎn)移菌體,，不能做系列稀釋，只有在菌體數(shù)量較少的時(shí)候適用,，其最大的優(yōu)點(diǎn)是取樣過程不破壞樣品,。常用的表面取樣技術(shù)包括棉拭子、淋洗法,、膠帶法等,，這里以棉拭子法為例。微生物定性檢測(cè)時(shí),，只要涂抹全部需要檢測(cè)的表面即可,。
而進(jìn)行的微生物定量檢測(cè)時(shí)，必須先用滅菌取樣框確定被測(cè)試的區(qū)域,。用干燥的棉花纏在4cm長(zhǎng),，直徑1-1.5mm的木棒或不銹鋼棒上做成棉拭子（為了方便也可使用一次性棉簽），放進(jìn)合金試管中，蓋上蓋子后滅菌,。取樣時(shí)先將拭子在稀釋液中浸濕,，然后再待測(cè)樣品表面緩慢旋轉(zhuǎn)拭子平行用力涂抹兩次。涂抹過程中應(yīng)保證拭子在取樣框內(nèi),。取樣后拭子重新裝回有10mL取樣溶液的試管中,。
以上就是各種情況下無(wú)菌抽樣的操作要求。無(wú)菌抽樣的規(guī)范性是保證樣品微生物檢測(cè)準(zhǔn)確性的前提,，因此我們?cè)谌訒r(shí)應(yīng)規(guī)范操作,，確保從源頭杜絕污染。