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嘿,，液相色譜儀的維護(hù)與保養(yǎng)，點(diǎn)擊這里......
閱讀：1890 發(fā)布時(shí)間：2020-9-14根據(jù)液相色譜儀的硬件組成模塊,，按照流動(dòng)相經(jīng)過(guò)的順序：流動(dòng)相溶劑瓶→高壓泵→進(jìn)樣器→色譜柱→檢測(cè)器→廢液。逐步闡述高效液相色譜儀在日常使用中正確的維護(hù)及相關(guān)的注意事項(xiàng),。
1.流動(dòng)相溶劑瓶
溶劑瓶是流動(dòng)相的起點(diǎn),，通常是盛放水相溶液或是有機(jī)相溶液。
1.水相溶液
對(duì)于水相溶液來(lái)說(shuō),，首要的問(wèn)題是防止污染,。雖然液相用的水大都經(jīng)過(guò)殺菌處理，但是細(xì)菌的生命力很頑強(qiáng),，在適當(dāng)?shù)臏囟群凸庹涨闆r下,，它們就會(huì)活躍起來(lái)，如果在流動(dòng)相里加入磷酸鹽一類的添加劑,，它們更是如虎添翼,。所以，對(duì)于溶劑瓶我們要做的非常重要的工作就是勤換流動(dòng)相,，常換常新,。
2.有機(jī)相溶液
對(duì)于有機(jī)相溶液，可以不用擔(dān)心細(xì)菌繁殖的問(wèn)題,。但是有機(jī)相容易發(fā)生聚合,，特別是乙腈在適宜的光照條件下極易發(fā)生聚合，瓶子里就會(huì)出現(xiàn)一些絮狀的聚合沉淀物,。為了防止聚合過(guò)程的發(fā)生,，裝乙腈時(shí)要用棕色的溶劑瓶，避免陽(yáng)光直射,，更換乙腈時(shí)應(yīng)當(dāng)棄去瓶底剩余的溶液,。
3.清洗過(guò)濾
溶劑瓶里的過(guò)濾頭，其作用是為了防止溶液瓶中的顆粒雜質(zhì)進(jìn)入到儀器的流路系統(tǒng)中,，它的材質(zhì)通常分為玻璃燒結(jié)石英和不銹鋼,，如果不慎堵塞會(huì)造成流動(dòng)相吸液不暢，因此必須進(jìn)行清洗,，玻璃材質(zhì)的通常是用稀硝酸泡,，而不銹鋼材質(zhì)的可以直接進(jìn)行超聲清洗。
4.流動(dòng)相的脫氣
脫氣的目的是為了除去流動(dòng)相中溶解的氣體,，使色譜泵的輸液準(zhǔn)確,，保留時(shí)間和色譜峰面積再現(xiàn)性提高;使基線穩(wěn)定,，信噪比增加，防止氣泡引起尖峰,，從而提高檢測(cè)器性能;減少死體積,，防止填料氧化，從而保護(hù)色譜柱,。目前常用的脫氣方法有以下4種,。
(1)氦氣脫氣法:利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣,，效果較好,，但成本高；
(2)加熱回流法:效果較好,，但操作復(fù)雜,，且有毒性揮發(fā)污染；
(3)真空脫氣法:易抽走有機(jī)相,；
(4)超聲脫氣法:流動(dòng)相放在超聲波容器中,，用超聲波振蕩10～15min，此方法效果較差,，但操作簡(jiǎn)單,。實(shí)際工作中，超聲脫氣法操作簡(jiǎn)單,，仍被廣泛應(yīng)用,，雖然此方法有時(shí)會(huì)引起氣體溶解度的增加，但基本上能滿足日常分析操作的要求,。
2.高壓泵的保養(yǎng)
泵是液相色譜的核心,，泵將流動(dòng)相從溶劑瓶輸送到液相流路系統(tǒng)中，并要在高壓下保持流量和壓力的穩(wěn)定,。狀態(tài)正常的高壓泵是液相色譜準(zhǔn)確分析的基礎(chǔ),，所以平日一定要重視對(duì)泵的維護(hù)。
很多情況下,，泵的問(wèn)題反映在壓力上,，壓力波動(dòng)又是常見(jiàn)的一類問(wèn)題。泵正常的壓力波動(dòng)通常會(huì)在2%以內(nèi),，且平穩(wěn)規(guī)律;不正常的波動(dòng)通常由氣泡和鹽造成,。如果流動(dòng)相中的氣泡沒(méi)有被脫氣機(jī)除掉而到了泵以后，就會(huì)造成壓力波動(dòng),，通常我們可以通過(guò)重新清洗(purge)流路和再次脫氣流動(dòng)相加以解決,。
由鹽造成的波動(dòng)主要是因?yàn)榱鲃?dòng)相中加入了濃度較高的緩沖鹽，在含鹽流動(dòng)相與有機(jī)相混合的時(shí)候,，鹽會(huì)有微小的析出,，從而導(dǎo)致壓力異常波動(dòng),，解決這類問(wèn)題可以考慮適當(dāng)降低鹽的濃度,。如果一定要用到此類流動(dòng)相,，可以考慮在有機(jī)相中加入一定比例的水，然后適當(dāng)提高梯度結(jié)束的終點(diǎn),。
3.進(jìn)樣器的保養(yǎng)
進(jìn)樣器分手動(dòng)和自動(dòng)兩大類,，雖然兩者工作模式不同，但使用的要點(diǎn)是基本一致的,。
1.防止交叉污染
自動(dòng)進(jìn)樣器比較常見(jiàn)的問(wèn)題是交叉污染,，交叉污染產(chǎn)生的原因很直接，樣品殘留在進(jìn)樣針內(nèi)外表面,，并隨下一次進(jìn)樣進(jìn)入色譜系統(tǒng),。要解決交叉污染，主要靠清洗,。自動(dòng)進(jìn)樣器都會(huì)有洗針的功能,，如果樣品濃度較高或者是吸附性比較強(qiáng)，一定要打開此功能,；如果未打開洗針功能,，污染可能已經(jīng)殘留在了針座或流通閥上，那么這兩個(gè)部件需及時(shí)超聲清洗,。
出現(xiàn)在自動(dòng)進(jìn)樣器上的另外一個(gè)問(wèn)題是峰面積重現(xiàn)性差,，考慮可能與自動(dòng)進(jìn)樣器吸取樣品有關(guān)。首先觀察樣品的液面是不是足夠高,，以保證進(jìn)樣器可以吸到樣品,。排除這個(gè)問(wèn)題后，再察看自動(dòng)進(jìn)樣器的設(shè)置,，對(duì)于一些粘度大的樣品,，要降低自動(dòng)進(jìn)樣器的吸取速度。
2.精細(xì)操作
手動(dòng)進(jìn)樣器的操作要點(diǎn)大致相同,，應(yīng)使用液相色譜儀平頭進(jìn)樣針,，進(jìn)樣時(shí)插針應(yīng)插到底，不使用時(shí)將針頭留在進(jìn)樣器內(nèi),，使用前后都要及時(shí)清洗,。
4.色譜柱的保養(yǎng)
色譜柱是化合物分離的關(guān)鍵。保養(yǎng)良好的色譜柱具有很高的塔板數(shù),，且儀器基線平穩(wěn),。色譜柱一般比較昂貴，在平時(shí)的工作中要注意以下幾個(gè)事項(xiàng)：
(1)色譜柱不能夠碰撞,、彎曲或強(qiáng)烈振蕩,。安裝時(shí)要保證閥件或管路的清潔,；
(2)流動(dòng)相在使用前必須進(jìn)行脫氣處理，盡量不使用或少使用高粘度的流動(dòng)相,；
(3)在滿足靈敏度的情況下,，盡可能使用小進(jìn)樣量。如果樣品比較“臟”,，要進(jìn)行凈化或提純處理,；
(4)分析結(jié)束后，要清洗進(jìn)樣閥中殘留的樣品,，并用流動(dòng)相或適當(dāng)?shù)娜軇┣逑瓷V柱,；
(5)如色譜柱長(zhǎng)期不用，應(yīng)該用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑保存并封閉或定期給柱子補(bǔ)充合適的流動(dòng)相,。對(duì)于反相柱可以儲(chǔ)存于純甲醇或乙腈中,，正相柱可以存放于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中，離子交換柱可以儲(chǔ)存于水中,。
5,、檢測(cè)器的保養(yǎng)
目前市場(chǎng)上檢測(cè)器的種類繁多，而且各有特性,。以常用的紫外(VWD)/二極管陣列(DAD)檢測(cè)器來(lái)說(shuō),，這兩類都是紫外類的檢測(cè)器，雖然光路設(shè)計(jì)不同,，但是本質(zhì)原理都是相同的,。
1.光源部分
檢測(cè)器中非常重要的部件是光源，光源對(duì)發(fā)射能量有要求,，一旦能量衰減到一定程度,，就會(huì)出現(xiàn)基線噪聲變大，靈敏度降低等一系列影響使用的問(wèn)題,，因此光源是一個(gè)消耗品,。通常紫外燈的壽命是2000h，當(dāng)?shù)竭_(dá)這個(gè)時(shí)限的時(shí)候,，我們就要特別關(guān)注燈的能量狀況,，可以通過(guò)儀器維護(hù)軟件中自帶的“燈能量測(cè)試”功能來(lái)判斷，測(cè)試的結(jié)果會(huì)分別評(píng)估低,、中,、高三個(gè)波長(zhǎng)段的能量，一旦某個(gè)波長(zhǎng)段的測(cè)試結(jié)果顯示失敗,，就表示需要更換燈,。
2.檢測(cè)池
檢測(cè)器中另一個(gè)重要部件是檢測(cè)池，也叫流通池。通常大家關(guān)心的一個(gè)問(wèn)題是檢測(cè)池被堵掉,，因?yàn)闄z測(cè)池通常不是很耐壓,，所以一旦被堵就很可能造成損壞。事實(shí)上檢測(cè)池通常不太容易被堵,，原因是幾乎所有的顆粒雜質(zhì)都會(huì)被色譜柱攔下了,，所以堵塞檢測(cè)器的東西基本都不是來(lái)自樣品的，很可能是后來(lái)“產(chǎn)生”的,，比如含鹽流動(dòng)相殘留在檢測(cè)池中導(dǎo)致鹽析出,。
6廢液的處置
液相色譜儀的廢液大部分含有有機(jī)溶劑,，會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一定的危害,，對(duì)環(huán)境也會(huì)產(chǎn)生污染，嚴(yán)禁隨意傾倒,，應(yīng)及時(shí)處理,。目前，國(guó)內(nèi)大部分實(shí)驗(yàn)室是將廢液送到專門的廢液處理站集中進(jìn)行無(wú)害化處理,。