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1 ,、高壓泵
HPLC使用的色譜柱是很細(xì)的(1~6mm),,所用固定相的粒度也非常?。◣爪蘭到幾十μm),,所以流動(dòng)相在柱中流動(dòng)受到的阻力很大,,在常壓下,流動(dòng)相流速十分緩慢,,柱效低且費(fèi)時(shí),。為了達(dá)到快速、高效分離,,必須給流動(dòng)相施加很大的壓力,以加快其在柱中的流動(dòng)速度,。為此,,須用高壓泵進(jìn)行高壓輸液,。高壓,、高速是高效液相色譜的特點(diǎn)之一。
2 ,、梯度洗提
類似于GC中的程序升溫,。已成為現(xiàn)代高效液相色譜中不能少的部分,。
梯度洗提,就是載液中含有兩種(或更多)不同極性的溶劑,,在分離過程中按一定的程序連續(xù)改變載液中溶劑的配比和極性,,通過載液中極性的變化來(lái)改變被分離組分的分離因素,以提高分離效果,。
3 ,、進(jìn)樣裝置
(1)注射器進(jìn)樣裝置:進(jìn)樣所用微量注射器及進(jìn)樣方式與GC法一樣。進(jìn)樣壓力<150×105Pa,,當(dāng)進(jìn)樣壓力>150×105Pa時(shí),,必須采用停流進(jìn)樣。
(2)高壓定量進(jìn)樣閥:與GC法用的流通法相似,,能在高壓下進(jìn)樣,。
4、色譜柱
色譜柱是色譜儀最重要的部件(心臟),。通常用后壁玻璃管或內(nèi)壁拋光的不銹鋼管制作的,,對(duì)于一些有腐蝕性的樣品且要求耐高壓時(shí),可用銅管,、鋁管或聚四氟乙烯管,。
柱子內(nèi)徑一般為1~6mm。常用的標(biāo)準(zhǔn)柱型是內(nèi)徑為4.6或3.9mm ,,長(zhǎng)度為15~30cm的直形不銹鋼柱。填料顆粒度5~10μm ,,柱效以理論塔板數(shù)計(jì)大約7000~10000 ,。
發(fā)展趨勢(shì)是減小填料粒度和柱徑以提高柱效,。
5、檢測(cè)器
主要包括紫外光度檢測(cè)器、光電二極管陣列檢測(cè)器,、熒光檢測(cè)器,、差示折光檢測(cè)器和電導(dǎo)檢測(cè)器,。
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