一,、排氣不凈,。

在升壓前應(yīng)將鍋內(nèi)冷空氣排凈，因空氣是熱不良導(dǎo)體,，若不排凈,，冷空氣就會聚集井滯留在滅菌鍋中消毒筒的中下部，圍繞在待滅菌物的周圍,。在這種情況下,，假若鍋內(nèi)僅排出一半空氣，當(dāng)壓力表指針達到105Pa時,，鍋內(nèi)實際溫度僅能達到 112℃,，比要求的 121℃低9℃之多，將導(dǎo)致滅菌不好,，可能造成大面積染菌,。（自動的高壓滅菌鍋 上下排氣閥 都要打開 然后加熱 排空氣）

二、排氣軟管沒有按要求插入滅菌筒的下部,，或排氣軟管斷裂,、缺失。

滅菌鍋內(nèi)的冷空氣是通過排氣軟管排出的,，上述情況將造成滅菌筒外的蒸汽直接經(jīng)排氣閥排出鍋外,，滅菌鍋內(nèi)的空氣排放受阻。

三,、消毒筒內(nèi)物品堆積太緊,、太滿。

阻礙蒸汽的流通和熱交換，使容器內(nèi)升溫減慢,，造成物體內(nèi)部殺菌不好,。

四、升溫過快,。

滅菌的時間是以達到要求溫度后的持續(xù)時間計算的,，但溫度的升降過程同樣起到殺菌的作用，升降溫度過快會通過影響總的積溫而影響滅菌效果,。另外,，升溫過快，特別是使用外源蒸汽的情況下,，會造成被滅菌物體內(nèi)部升溫滯后于壓力表指示溫度,。

五、滅菌的物體體積（容量）過大,。

組織培養(yǎng)中或常規(guī)微生物實驗中,，高溫蒸汽滅菌通常要在 121℃（即蒸汽壓力為1kg／cm2或 15磅／寸2，或0.105MPa）下保溫15min,。這一規(guī)定僅適用于試管,、三角瓶中小于200ml容量的。若體積太大,，特別是固體培養(yǎng)基,，會造成滅菌，應(yīng)適當(dāng)延長滅菌時間,。

六,、任意延長滅菌時間。

規(guī)定的滅菌溫度和時間是經(jīng)過科學(xué)試驗確定的,，只要按照正確的滅菌程序是能達到滅菌目的的,。但在實踐中常有人為了“保證滅菌"而任意延長滅菌時間。這樣忽視了殺菌過程中溫度對培養(yǎng)基成分的破壞作用,，是得不償失的。

七,、溫度不穩(wěn)定,。

滅菌過程中溫度（壓力）忽高忽低，特別是手提式電能滅菌鍋,，它沒有控溫裝置,，難于控溫。操作者可配置調(diào)壓變壓器,，通過調(diào)節(jié)電壓控溫,。此外，還常遇到滅菌鍋內(nèi)加水太少（應(yīng)加 2～3L）；容器內(nèi)裝的溶液量過多（應(yīng)少于2／3）,；安全閥失靈等問題,。