1.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動,。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況,；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此,，在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進行,，在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。

2.應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,，特別是反相色譜中,，不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?/span>

3.一般說來色譜柱不能反沖,，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效,。

4.選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),，以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一預(yù)柱,，分析柱是鍵合硅膠時,，預(yù)柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和",，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解,。

5.經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì),。在進行清洗時,，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,。

下面列舉一些色譜柱的清洗溶劑及順序,，作為參考：

硅膠柱以正已烷(或庚烷)、二氯甲烷和甲醇依次沖洗，然后再以相反順序依次沖洗,，所有溶劑都必須嚴(yán)格脫水,。

甲醇能洗去殘留的強極性雜質(zhì)，已烷使硅膠表面重新活化,。反相柱以水,、甲醇、乙腈,、一氯甲烷(或氯仿)依次沖洗,，再以相反順序依次沖洗。如果下一步分析用的流動相不含緩沖液,，那么可以省略最后用水沖洗這一步,。

四氫呋喃與乙腈或甲醇的混合溶液能除去類脂。有時也注射二甲亞砜數(shù)次,。此外,，用乙腈、丙酮和三氟醋酸(0.1%)梯度洗脫能除去蛋白質(zhì)污染,。

陽離子交換柱可用稀酸緩沖液沖洗,，陰離子交換柱可用稀堿緩沖液沖洗，除去交換性能強的鹽,，然后用水,、甲醇、二氯甲烷(除去吸附在固定相表面的有機物),、甲醇,、水依次沖洗。

6.保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,，柱接頭要擰緊,，防止溶劑揮發(fā)干燥。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間,。

7.色譜柱使用過程中,，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M行清洗,；另一種可能是大分子進入柱內(nèi)，使柱頭被污染,；如果柱效降低或色譜峰變形,，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，使體積增大,。在后兩種情況發(fā)生時，小心擰開柱接頭，用潔凈小鋼將柱頭填料取出1～2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內(nèi)填料整平,。然后用適當(dāng)溶劑濕潤的固定相(與柱內(nèi)相同)填滿色譜柱,，壓平，再擰緊柱接頭,。這樣處理后柱效能得到改善,，但是很難恢復(fù)到新柱的水平。柱子失效通常是柱端部分,，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱(5～30mm),，可以起到保護、延長柱壽命的作用,。采用保護柱會損失一定的柱效,，這是值得的。通常色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上,。以硅膠為基質(zhì)的填料,，只能在pH=2～9范圍內(nèi)使用。柱子使用一段時間后,，可能有一些吸附作用強的物質(zhì)保留于柱頂,，特別是一些有色物質(zhì)更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙稀?/span>

8.新的色譜柱在使用一段時間后柱頂填料可能塌陷，使柱效下降,，這時也可補加填料使柱效恢復(fù),。每次工作完后，最好用洗脫能力強的洗脫液沖洗,，例如,，ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動相時,，使用完后應(yīng)用無鹽流動相沖洗,。含鹵族元素(氟、氯,、溴)的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道,，不宜長期與之接觸。裝在HPLC儀上柱子如不經(jīng)常使用,，應(yīng)每隔4～5天開機沖洗15分鐘,。

Dionex IonPac CS20 IC 柱 離子色譜柱，可在堿金屬后,、堿土金屬前洗脫大多數(shù)胺類,，從而將讓定量分析變得極為困難的胺類從基質(zhì)離子上移除。其選擇性使得 Dionex IonPac CS20 格外適合測定多種烷基胺和烷醇胺,。