一,、流動相不過濾

因為塵埃或其它任何雜質(zhì)微粒都會磨損柱塞,、密封環(huán),、缸體和單向閥，因此應(yīng)預(yù)先除去流動相中的任何固體微粒,。流動相最好在玻璃容器內(nèi)蒸餾,，而常用的方法是濾過,，可采用Millipore濾膜（0.2μm或0.45μm）等濾器。泵的入口都應(yīng)連接砂濾棒（或片）,。輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常清洗或更換,。

二、使用后沒有及時清洗泵

流動相不應(yīng)含有任何腐蝕性物質(zhì),，含有緩沖液的流動相不應(yīng)保留在泵內(nèi),，尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下。如果將含緩沖液的流動相留在泵內(nèi),，由于蒸發(fā)或泄漏,，甚至只是由于溶液的靜置，就可能析出鹽的微細晶體,，這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等,。因此，必須泵入純水將泵充分清洗后,，再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑（對于反相鍵合硅膠固定相,，可以是甲醇或甲醇-水）。

三,、流動相走空

泵工作時要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完,，否則空泵運轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、缸體或密封環(huán),，最終產(chǎn)生漏液,。
沒有流動相流出，又無壓力指示怎么辦,？可能是泵內(nèi)有大量氣體,，這時可打開泄壓閥，使泵在較大流量（如5ml/min）下運轉(zhuǎn),，將氣泡排盡,，也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環(huán)磨損,，需更換,。

四、壓力和流量不穩(wěn)了,？

原因可能是氣泡,，需要排除；或者是單向閥內(nèi)有異物,，可卸下單向閥,，浸入丙酮內(nèi)超聲清洗。有時可能是砂濾棒內(nèi)有氣泡，或被鹽的微細晶?；蜃躺奈⑸锊糠侄氯?，這時，可卸下砂濾棒浸入流動相內(nèi)超聲除氣泡,，或?qū)⑸盀V棒浸入稀酸（如4mol/L硝酸）內(nèi)迅速除去微生物,，或?qū)Ⅺ}溶解，再立即清洗,。
壓力為啥過高或過低,？可能是是管路被堵塞，需要清除和清洗,。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏,。檢查堵塞或泄漏時應(yīng)逐段進行。
在進行梯度洗脫時,，由于多種溶劑混合,，而且組成不斷變化，因此帶來一些特殊問題,，必須充分重視,。
PS：在液相色譜中對組分復(fù)雜的樣品采用梯度洗脫的方法。在同一個分析周期中,，按一定程序不斷改變流動相的濃度配比,，稱為梯度洗脫。從而可以使一個復(fù)雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的,。
梯度洗脫的優(yōu)點：

1. 縮短分析周期,；

2. 提高分離能力；

3. 峰型得到改善,，很少拖尾,；

4. 增加靈敏度。但有時引起基線漂移,。

五,、梯度洗脫的流動相選擇不當(dāng)

要注意溶劑的互溶性，不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相,。有些溶劑在一定比例內(nèi)混溶,，超出范圍后就不互溶，使用時更要引起注意,。當(dāng)有機溶劑和緩沖液混合時,，還可能析出鹽的晶體，尤其使用磷酸鹽時需特別小心,。

六、忽略的空白梯度洗脫

梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高，以保證良好的重現(xiàn)性,。進行樣品分析前必須進行空白梯度洗脫,，以辨認(rèn)溶劑雜質(zhì)峰，因為弱溶劑中的雜質(zhì)富集在色譜柱頭后會被強溶劑洗脫下來,。用于梯度洗脫的溶劑需脫氣,，以防止混合時產(chǎn)生氣泡。

GI-3000-01等度液相色譜儀,，系統(tǒng)由手動進樣器,、高壓恒流泵、色譜柱（可選柱溫箱）,、UV紫外檢測器四單元部分以及功能強大的色譜軟件所組成,，所有單元模塊均具有高效液相兼容性，讓所有使用者獲得較好的性能,，較少設(shè)備和耗材費用支出,。GI-3000系列提供了各類輸液泵，多種檢測器和手動/自動進樣器,。為用戶提供了多種選擇,，從而為用戶的分析提供了多方位的解決方案。