【流動(dòng)相不過濾】

因?yàn)閴m?；蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會(huì)磨損柱塞、密封環(huán),、缸體和單向閥,，因此應(yīng)預(yù)先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相最好在玻璃容器內(nèi)蒸餾,，而常用的方法是濾過,，可采用Millipore濾膜（0.2μm或0.45μm）等濾器。泵的入口都應(yīng)連接砂濾棒（或片）,。輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常清洗或更換,。

【使用后沒有及時(shí)清洗泵】

流動(dòng)相不應(yīng)含有任何腐蝕性物質(zhì)，含有緩沖液的流動(dòng)相不應(yīng)保留在泵內(nèi),，尤其是在停泵過夜或更長時(shí)間的情況下,。如果將含緩沖液的流動(dòng)相留在泵內(nèi)，由于蒸發(fā)或泄漏,，甚至只是由于溶液的靜置,，就可能析出鹽的微細(xì)晶體，這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等,。因此,，必須泵入純水將泵充分清洗后，再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護(hù)的溶劑（對于反相鍵合硅膠固定相,，可以是甲醇或甲醇-水）,。

【流動(dòng)相走空】

泵工作時(shí)要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動(dòng)相被用完，否則空泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會(huì)磨損柱塞,、缸體或密封環(huán),，最終產(chǎn)生漏液。沒有流動(dòng)相流出,，又無壓力指示怎么辦,？可能是泵內(nèi)有大量氣體,，這時(shí)可打開泄壓閥，使泵在較大流量（如5ml/min）下運(yùn)轉(zhuǎn),，將氣泡排盡,，也可用一個(gè)50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個(gè)可能原因是密封環(huán)磨損,，需更換,。

【壓力和流量不穩(wěn)】

原因可能是氣泡，需要排除,；或者是單向閥內(nèi)有異物,，可卸下單向閥，浸入丙酮內(nèi)超聲清洗,。有時(shí)可能是砂濾棒內(nèi)有氣泡,，或被鹽的微細(xì)晶粒或滋生的微生物部分堵塞,，這時(shí),，可卸下砂濾棒浸入流動(dòng)相內(nèi)超聲除氣泡,，或?qū)⑸盀V棒浸入稀酸（如4mol/L硝酸）內(nèi)迅速除去微生物,，或?qū)Ⅺ}溶解，再立即清洗,。

壓力為啥過高或過低,？可能是是管路被堵塞，需要清除和清洗,。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏,。檢查堵塞或泄漏時(shí)應(yīng)逐段進(jìn)行。在進(jìn)行梯度洗脫時(shí),，由于多種溶劑混合,，而且組成不斷變化，因此帶來一些特殊問題,，必須充分重視,。PS：在液相色譜中對組分復(fù)雜的樣品采用梯度洗脫的方法。在同一個(gè)分析周期中,，按一定程序不斷改變流動(dòng)相的濃度配比,，稱為梯度洗脫。從而可以使一個(gè)復(fù)雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達(dá)到良好的分離目的,。梯度洗脫的優(yōu)點(diǎn)：1.縮短分析周期,；2.提高分離能力；3.峰型得到改善,，很少拖尾,；4.增加靈敏度,。但有時(shí)引起基線漂移。

【梯度洗脫的流動(dòng)相選擇不當(dāng)】

要注意溶劑的互溶性,，不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動(dòng)相,。有些溶劑在一定比例內(nèi)混溶，超出范圍后就不互溶,，使用時(shí)更要引起注意,。當(dāng)有機(jī)溶劑和緩沖液混合時(shí)，還可能析出鹽的晶體,，尤其使用磷酸鹽時(shí)需特別小心,。