高效液相色譜法的主要優(yōu)點是：
⑴分辯率高于其它色譜法,；⑵速度快，十幾分鐘到幾十分鐘可完成,；⑶重復性高,；⑷高效相色譜柱可反復使用；⑸自動化操作,，分析精確度高,。
高效液相色譜法的常見問題有：
1、渦流擴散
流動相碰到較大的固體顆粒,，就像流水碰到石頭一樣產(chǎn)生渦流,。如果柱裝填得不均勻，有的部分松散或有細溝,，則流動相的速度就快,；有的部位結塊或裝直緊密則流就慢,，多條流路有快有慢，就使區(qū)帶變寬,。因此,，固相載體的顆粒要小而均勻，裝柱要松緊均一,，這樣渦流擴散小,，柱效率高。
2,、分子擴散
分子擴散就是物質(zhì)分子由濃度高的區(qū)域向濃度低的區(qū)域運動,，也稱縱向分子擴散。要減少分子擴散就要采用小而均勻的固相顆粒裝柱,。同時在操作時,，如果流速太慢，被分離物質(zhì)停留時間長,，則擴散嚴重,。
3、質(zhì)量轉(zhuǎn)移
被分離物質(zhì)要在流動相與固定相中平衡,，這樣才能形成較窄的區(qū)帶,。在液相色譜中，溶質(zhì)分子要在兩個液相之間進行分配,，或在固相上被吸附和解吸附均需要一定的時間,。當流速快時，轉(zhuǎn)移速度慢,，來不及達到平衡動相就向前移,，這各物質(zhì)的非平衡移動，使區(qū)帶變寬,。
4,、動相流速
當流速太低時，分子擴散嚴重,，特別是在氣相色譜中尤為突出,。如將理論塔板高度對流速作圖，理論塔板高度隨流速增加而急速下降,，流速再加大則質(zhì)量轉(zhuǎn)移起主要作用,，理論塔板高度又加大。在高效液相色譜中,，流速稍快影響不大,，但在凝膠過濾色譜中，因為物質(zhì)要滲透到凝膠內(nèi)部，所以質(zhì)量轉(zhuǎn)移影響大,，流速咖大會降低柱效率,。
5、固定相顆粒大小
定相顆粒越小柱效率越高,，對流動相流動的阻力越大,，需要加大壓力才能使它流動。
