高效液相色譜儀由高壓輸液泵,、進(jìn)樣系統(tǒng),、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱,、檢測器,、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。應(yīng)用于生物化學(xué),、生物醫(yī)學(xué),、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門,。
高效液相色譜儀3大系統(tǒng)：
系統(tǒng)由儲液器,、泵、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測器、記錄儀等幾部分組成,。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相，被流動相載入色譜柱內(nèi),，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),，在兩相中作相對運(yùn)動時，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,，通過檢測器時，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng),、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng),、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),，下面將分別敘述其各自的組成與特點(diǎn)。
1,、分離系統(tǒng)：該系統(tǒng)包括色譜柱,、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為10～50cm,，內(nèi)徑為2～5mm,，由"不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成，住內(nèi)裝有直徑為5～10μm粒度的固定相,。固定相中的基質(zhì)是由機(jī)械強(qiáng)度高的樹脂或硅膠構(gòu)成,，它們都有惰性、多孔性和比表面積大的特點(diǎn),，加之其表面經(jīng)過機(jī)械涂漬,，或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因或配體的有機(jī)化合物。因此,，這類固定相對結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性,。
2、進(jìn)樣系統(tǒng)：液相色譜儀一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作,，進(jìn)樣量是恒定的,。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。
3,、輸液系統(tǒng)：該系統(tǒng)包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分,。高壓泵的一般壓強(qiáng)為l.47～4.4X10Pa,，流速可調(diào)且穩(wěn)定，當(dāng)高壓流動相通過層析柱時,，可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng),，可加快其在柱中的移動速度，這對提高分辨率,、回收樣品,、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存器和梯度儀，可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變,，包括改變洗脫液的極性,、離子強(qiáng)度、PH值,，或改用競爭性抑制劑或變性劑等,。這就可使各種物質(zhì)都能獲得有效分離。
