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高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀(Liquid Chromatograph Mass Spectrometer),,簡(jiǎn)稱(chēng)LC-MS,,是液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的儀器。它結(jié)合了高效液相色譜-有效分離熱不穩(wěn)性及高沸點(diǎn)化合物的分離能力與質(zhì)譜儀很強(qiáng)的組分鑒定能力,,是一種分離分析復(fù)雜,、低豐度混合物的有效手段。
應(yīng)用范圍:藥物代謝及藥物動(dòng)力學(xué)研究,、臨床藥理學(xué)研究,、天然藥物(中草藥等)開(kāi)發(fā)研究等。
高效液相色譜--串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀
實(shí)驗(yàn)流程:
1,、樣品前處理:
(a)中藥樣品:將中藥樣品使用溶劑溶解后,,12000 r·min-1離心5 min。取上清液進(jìn)樣分析,;
(b)血漿(血清),、尿液:取一定體積的樣品,進(jìn)行蛋白沉淀(甲醇,、乙腈等),、液-液萃取(乙酸乙酯,、),渦旋振搖3 min,,12000 r·min-1離心5 min,。取上清液,氮?dú)饬鞔蹈?,?fù)溶,,12000 r·min-1離心5 min,取上清液進(jìn)樣分析,。
(c)糞便或其他組織樣品:將糞便或其他組織樣品勻漿后,,參照(b)進(jìn)行處理
2、色譜條件優(yōu)化:
(a)高效液相色譜-更換流動(dòng)相:改變有機(jī)相(甲醇/乙腈)-緩沖鹽(不同比例的甲酸,、磷酸)的比例,,從而使得不同分析物在色譜柱上分離,同時(shí)增加或不影響分析物在質(zhì)譜上的離子化,,優(yōu)化色譜峰形,。
(b)更換色譜柱:針對(duì)不同種類(lèi)的分析物,,使用不同類(lèi)型的色譜柱,使得分析物在色譜柱上有良好的保留,,同時(shí)分離度良好(R≥1.5),。
3、質(zhì)譜條件優(yōu)化:
(a)高效液相色譜-質(zhì)譜掃譜:根據(jù)不同分析物的分子質(zhì)量,,進(jìn)行質(zhì)譜掃譜,,確定母離子、子離子及相關(guān)質(zhì)譜參數(shù),。
(b)質(zhì)譜條件建立:根據(jù)上述質(zhì)譜掃譜結(jié)果,,建立質(zhì)譜檢測(cè)方法,確保分析物在質(zhì)譜上的特異性及高靈敏度,。
4,、方法學(xué)確證:針對(duì)不同的檢測(cè)項(xiàng)目(中藥含量測(cè)定、生物樣品中的藥物檢測(cè)等),,依據(jù)不同的相關(guān)法律,、法規(guī),對(duì)精密度,、準(zhǔn)確度,、穩(wěn)定性、線性等方法學(xué)項(xiàng)目進(jìn)行確證,,保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,、可信性、重復(fù)性,。
5,、檢測(cè)及數(shù)據(jù)分析。
服務(wù)說(shuō)明及結(jié)果:
1.客戶提供:
藥品:中藥提取液,、中藥凍干粉等
血漿或血清:大于100 μL(需提供一定體積的空白血漿)
尿液:大于500 μL(需提供一定體積的空白尿液)
糞便或其他組織樣品:10~100 mg2.公司提供:基本實(shí)驗(yàn)步驟,、樣品前處理、檢測(cè)結(jié)果,、數(shù)據(jù)處理過(guò)程及原始數(shù)據(jù),。
3.實(shí)驗(yàn)周期:25~30個(gè)工作日。
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