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液相色譜柱選擇的條件

時間:2021/6/22閱讀:683
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液相色譜柱填料基質(zhì)

1.硅膠基質(zhì):純度高本錢低,,強度大,化學(xué)修飾輕易,,但pH值范圍有限,。大多硅膠基質(zhì)填料在pH2-8之間穩(wěn)定,但經(jīng)過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10,。

2.聚合物基質(zhì):應(yīng)用pH值范圍寬,,溫度穩(wěn)定(高溫可以達(dá)到80度以上),機械強度小,。

顆粒外形

大多現(xiàn)代液相色譜柱填料都是球形顆粒,,但有時是不規(guī)則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓,、較高的柱效和穩(wěn)定性以及較長的柱壽命在使用高粘度的活動相時;不規(guī)則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價格,。

顆粒粒徑

粒徑越小柱效越高、分離度越高,,但同時會導(dǎo)致較高柱壓降,。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復(fù)雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱,。

含碳量

含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例,與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān),。高含碳量進(jìn)步柱容量,、分辨率及分析時間,用于要求高分離度的復(fù)雜樣品;低含碳量分析時間短,、展現(xiàn)不同的選擇性,,用于快速分析簡單樣品及需要高含水活動相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等,。

孔徑和比表面積

液相色譜柱吸附介質(zhì)是多孔的顆粒,,盡大多數(shù)的反應(yīng)表面于孔內(nèi)。因此,,分子必須進(jìn)進(jìn)孔內(nèi)才能被吸附和分離,。

孔徑和比表面積是相輔相成的兩個概念??讖叫”缺砻娣e大,,反之亦然。比表面積大,,增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng),,增加保存,上樣量和復(fù)雜成分的分離度;比表面積小,平衡時間快,,適合梯度分析,。

孔容和機械強度

孔容,又稱“孔體積”,。指單位顆粒的空隙體積大小,。它能很好的反應(yīng)填料的機械強度??左w積大的填料相對孔體積小的填料機械強度要略弱,。孔體積為1.5mL/g或更小的填料大多用于液相色譜柱分離,,而孔體積大于1.5mL/g的填料使用于尺寸排阻色譜和低壓色譜,。

封端封端

封端能夠降低極性堿性化合物由于與裸露的硅醇基相互作用而產(chǎn)生的拖尾峰。不封端鍵合相相對封端鍵合相會產(chǎn)生不同的選擇性,,尤其是極性樣品,。

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