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拿到一根新的色譜柱,,首先要做的事情是查看色譜柱的說明書,,了解色譜柱的基本信息,包括pH值范圍,、*高操作溫度,、大操作壓力等信息,再查看色譜柱柱效測試報告,,準(zhǔn)備柱效測試所用分析物及試劑,,然后按以下步驟進行色譜柱活化及柱效測試:
1 液相連接二通,,使用新鮮經(jīng)過濾的水和乙腈或甲醇(根據(jù)測試報告中的流動相選擇有機溶劑)沖洗液相系統(tǒng),,確保液相系統(tǒng)干凈,不含任何緩沖鹽和污染物,。
2 將色譜柱入口端連接到液相系統(tǒng)上,,柱出口端先不連接檢測器,應(yīng)直接連到廢液收集器,;色譜柱上有箭頭標(biāo)明正確方向,,取用色譜柱時避免磕碰掉落。
3 在0.1ml/min流速下用乙腈(甲醇)或保存溶劑潤洗色譜柱,少2小時,,或按照色譜柱說明書上的方法進行活化,。
4 參照柱效測試報告中的方法,更換柱效測試所用流動相,,緩慢調(diào)節(jié)流速至柱效測定流速,,平衡色譜柱,至少5-10倍柱體積流動相(例如:250×4.6mm 的色譜柱柱體積為 4.2 ml,,以 1 ml/min 流速10倍柱體積需要平衡 42 分鐘),,直至壓力和基線穩(wěn)定。
5參照柱效測試報告中的方法測試柱效,,如果測試結(jié)果略低于測試報告,,屬于正常情況,如果結(jié)果明顯偏低,、峰形拖尾,,說明所使用的色譜柱或液相系統(tǒng)處于非理想狀態(tài),需要進行排查,。
6 記錄測試方法及結(jié)果,,并作為定期柱效測試的參考值。
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