722分光光度計(jì)的使用方法指導(dǎo)

關(guān)鍵詞：分光光度計(jì)的使用方法,；美析儀器；UV-1100;UV-1200

分光光度法是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析,。常用的波長(zhǎng)范圍為：（1）200～400nm的紫外光區(qū)（2）400～760nm的可見(jiàn)光區(qū),（3）2.5～25μm（按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區(qū)。
所用儀器為紫外分光光度計(jì),、可見(jiàn)光分光光度計(jì)（或比色計(jì)）,、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為保證測(cè)量的精密度和準(zhǔn)確度,，所有儀器應(yīng)按照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定,，定期進(jìn)行校正檢定。
分光光度計(jì)是精密光學(xué)儀器，正確安裝,、使用和保養(yǎng)對(duì)保持儀器良好的性能和保證測(cè)試的準(zhǔn)確度有重要作用,。
（1）儀器工作環(huán)境的要求
分光光度計(jì)對(duì)工作環(huán)境的要求如下：
①儀器應(yīng)安放在干燥的房間內(nèi)，使用溫度為5～35℃．相對(duì)濕度不超過(guò)85％,。
②儀器應(yīng)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上,，且避免強(qiáng)烈的振動(dòng)或持續(xù)的振動(dòng)。
③室內(nèi)照明不宜太強(qiáng),，且應(yīng)避免直射日光的照射,。
④電扇不宜直接向儀器吹風(fēng)，以防止光源燈因發(fā)光不穩(wěn)定而影響儀器的正常使用,。
⑤盡量遠(yuǎn)離高強(qiáng)度的磁場(chǎng),、電場(chǎng)及發(fā)生高頻波的電器設(shè)備。
⑥供給儀器的電源電壓為AC220V±22V,，頻率為50Hz±1Hz,，并必須裝有良好的接地線。推薦使用功率為1000w以上的電子交流穩(wěn)壓器或交流恒壓穩(wěn)壓器,，以加強(qiáng)儀器的抗干擾性能,。
⑦避免在有硫化氫等腐蝕性氣體的場(chǎng)所使用。
（2）儀器的日常維護(hù)和保養(yǎng)
①光源,。光源的壽命有限,，為了延長(zhǎng)光源使用壽命，在不使用儀器時(shí)不要開(kāi)光源燈,，應(yīng)盡量減少開(kāi)關(guān)次數(shù),。在短時(shí)問(wèn)的工作間隔內(nèi)可以不關(guān)燈。剛關(guān)閉的光源燈不能立即重新開(kāi)啟,。
儀器連續(xù)使用時(shí)間不應(yīng)超過(guò)3h,。若需長(zhǎng)時(shí)間使用，間歇30min,。
如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定,，應(yīng)及時(shí)更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置,，不要用手直接接觸窗口或燈泡,，避免油污沾附。若不小心接觸過(guò),，要用無(wú)水乙醇擦拭,。
②單色器。單色器是儀器的核心部分,，裝在密封盒內(nèi),，不能拆開(kāi),。選擇波長(zhǎng)應(yīng)平衡地轉(zhuǎn)動(dòng)，不可用力過(guò)猛,。為防止色散元件受潮生霉,，必須定期更換單色器盒干燥劑（硅膠）。若發(fā)現(xiàn)干燥劑變色,，應(yīng)立即更換,。
③吸收池。必須正確使用吸收池,，應(yīng)特別注意保護(hù)吸收池的兩個(gè)光學(xué)面,。
④檢測(cè)器。光電轉(zhuǎn)換元件不能長(zhǎng)時(shí)間曝光,，且應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵,。
⑤當(dāng)儀器停止工作時(shí)，必須切斷電源,。
⑥為了避免儀器積灰和沾污,，在停止工作時(shí)，應(yīng)蓋上防塵罩,。
⑦儀器若暫時(shí)不用要定期通電,，每次不少于20～30min，以保持整機(jī)呈干燥狀態(tài),，并且維持電子元器件的性能,。
紫外—可見(jiàn)分光光度計(jì)類(lèi)型
紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)按使用波長(zhǎng)范圍可分為：可見(jiàn)分光光度計(jì)和紫外一可見(jiàn)分光光度汁兩類(lèi)。前者使用的波長(zhǎng)范圍為400～780nm,；后者使用的波長(zhǎng)范圍為200～1000nm,。
按光路紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)可分為單光束式及雙光束式兩類(lèi)；按測(cè)量時(shí)提供的波長(zhǎng)數(shù)又可分為單波長(zhǎng)分光光度計(jì)和雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)兩類(lèi),。
所謂單光束是指從光源中發(fā)出的光,，經(jīng)過(guò)單色器等一系列光學(xué)元件及吸收池后，zui后照在檢測(cè)器上時(shí)始終為一束光,。常用的單光束紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)有UV-1100型,、UV-1200型、UV-1300型,、UV-1400 型、UV-1500型,、UV-1700PC 型,、UV-1800PC型、 UV-1900PC型等,。常用的單光束可見(jiàn)分光光度計(jì)有V-1100型,、V-1200型,、V-1300型、V-1400型V-1500型,、 V-1600等,。
單光束分光光度計(jì)的特點(diǎn)是結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、價(jià)格低,，主要適于作定量分析,。其不足之處是測(cè)定結(jié)果受光源強(qiáng)度波動(dòng)的影響較大，因而給定量分析結(jié)果帶來(lái)較大誤差,。
雙光束分光光度計(jì)是指從光源中發(fā)出的光經(jīng)過(guò)單色器后被一個(gè)旋轉(zhuǎn)的扇形反射鏡（即切光器）分為強(qiáng)度相等的兩束光,，分別通過(guò)參比溶液和樣品溶液。利用另一個(gè)與前一個(gè)切光器同步的切光器,，使兩束光在不同時(shí)間交替地照在同一個(gè)檢測(cè)器上,，通過(guò)一個(gè)同步信號(hào)發(fā)生器對(duì)來(lái)自兩個(gè)光束的信號(hào)加以比較，并將兩信號(hào)的比值經(jīng)對(duì)數(shù)變換后轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的吸光度值,。
常用的雙光束紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)有710型,、730型、UV-1700PC 型,、UV-1800PC型,、UV-1900PC型等。這類(lèi)儀器的特點(diǎn)是：能連續(xù)改變波長(zhǎng),，自動(dòng)地比較樣品及參比溶液的透光強(qiáng)度,，自動(dòng)消除光源強(qiáng)度變化所引起的誤差。對(duì)于必須在較寬的波長(zhǎng)范圍內(nèi)獲得復(fù)雜的吸收光譜曲線的分析,，此類(lèi)儀器極為合適,。
雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)與單波長(zhǎng)分光光度計(jì)的主要區(qū)別在于采用雙單色器，以同時(shí)得到兩束波長(zhǎng)不同的單色光,。光源發(fā)出的光分成兩束,，分別經(jīng)兩個(gè)可以自由轉(zhuǎn)動(dòng)的光柵單色器，得到兩束具有不同波長(zhǎng)A1和A2的單色光,。借切光器,，使兩束光以一定的時(shí)間問(wèn)隔交替照射到裝有試液的吸收池上，由檢測(cè)器顯示出試液在波長(zhǎng)λ1和λ2的透射比差值△r或吸光度差值△A,，則
△A＝Aλ1－Aλ2＝﹙Eλ1－Eλ2）bc
由式可知,，△A與吸光物質(zhì)c成正比。這就是雙波長(zhǎng)分光光度進(jìn)行定量分析的理論根據(jù),。
常用的雙光束分光光度計(jì)有美析UV-1700PC 型,、UV-1800PC型、UV-1900PC型,、日本島津UV一300,、UV一365等,。
這類(lèi)儀器特別適合混合物和渾濁樣品的定量分析，準(zhǔn)確度高,，可進(jìn)行導(dǎo)數(shù)光譜分析等,。其不足之處是價(jià)格昂貴。

關(guān)鍵詞：分光光度計(jì)的使用方法,；美析儀器,；UV-1100;UV-1200