關(guān)鍵詞：維生素A,；紫外分光光度計(jì),；

美析儀器：UV-1100;UV-1200

1．原理

維生素A的異丙醇溶液在325 nm波長下有大吸收峰,，其吸光度與維生素A的含量成正比,。本法的靈敏度較比色法高，可測定維生素A含量低于5µg／g的樣品,。主要缺點(diǎn)是在維生素A大吸收波長325 nm附近許多其他化合物也有吸收,，干擾測定，故本法適用于透明魚油,，維生素A的濃縮物等純度較高的樣品,。對于一般樣品，測定前必須先將脂肪抽提出來進(jìn)行皂化,，萃取其不皂化部分,，再經(jīng)柱層析除去干擾物。

2．儀器

紫外分光光度計(jì); UV-1100;UV-1200,。

3．試劑

①異丙醇,。

②維生素A標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取1 g相當(dāng)于50 000單位維生素A的濃魚肝油0．1000 g，加異丙醇溶解,，定容至125 mL,。此溶液1 mL相當(dāng)于40單位(即40 IU．mL-1)。

4.測定步驟

①標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：分別取維生素A標(biāo)準(zhǔn)溶液(40 IU·mL-1)O．5,、1．0,、1．5、2．0,、2．5,、3．0、4.0 mL，于10 mL棕色容量瓶中,，用異丙醇定容。以空白液調(diào)儀器零點(diǎn),，于紫外分光光度計(jì)上在325 nm波長下分別測定吸光度,，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

②樣品測定：稱取適量樣品,，按照三氯化銻比色法進(jìn)行皂化,、提取、洗滌,、濃縮,、蒸發(fā)醚層后，迅速用異丙醇溶解并移人50 mL容量瓶中,，用異丙醇定容,，于紫外分光光度計(jì)325nm處測定其吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相當(dāng)?shù)木S生素A含量,。

5．計(jì)算    X=[(c*V)/m]*100

式中：

X——樣品維生素A的含量,，IU·(100 g) -1；

c——由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的維生素A含量,，IU·mL-1,；

V——樣品的異丙醇溶液體積，mL,；

m——樣品質(zhì)量,，g。

關(guān)鍵詞：維生素A,；紫外分光光度計(jì),；

美析儀器：UV-1100;UV-1200