品名：Dojindo Kit-NH2生物素標(biāo)記試劑盒
貨號：LK03
規(guī)格型號：3samples/盒

產(chǎn)品特性
整個標(biāo)記過程僅需1個小時
整個標(biāo)記過程在1支過濾管中進行
熒光標(biāo)記抗體回收率高
適用于50-200 μg的IgG

Dojindo Biotin Labeling Kit-NH2生物素標(biāo)記試劑盒 產(chǎn)品描述
該試劑盒主要用于制備生物素標(biāo)記的蛋白質(zhì)，用于酶免疫分析（EIA）,。NH2-reactive biotin是試劑盒的成分之一,，它含有琥珀酰亞胺基（NHS），能與蛋白質(zhì)或者其它分子的氨基反應(yīng),。該試劑盒中包含了標(biāo)記所需的全部試劑,，標(biāo)記過程十分 簡便。只需將NH2-reactive biotin加入到IgG溶液中,，37℃培養(yǎng)10分鐘即可,。每個IgG分子平均能夠和5-8個生物素分子結(jié)合。過量的生物素分子能夠使用過濾管將其除去。
Biotin Labeling Kit-NH2 試劑盒內(nèi)容
- NH2-Reactive Biotin .......................... 3 tubes
- WS Buffer ......................................... 4 ml x 1
- Reaction Buffer ................................. 500 μl x 1
- Filtration Tube .................................. 3 tubes

 操作步驟
（1）將100 μl WS buffer以及含有100 μg IgG的樣品溶液加入到過濾管中,。a）
（2）8,000-10,000 g離心10分鐘,。b）
（3）將10 μl DMSO加入到NH2-reactive biotin中并用移液器吹打使其溶解。c）
（4）將100 μl Reaction buffer以及8 μl NH2-reactive biotin溶液加入到過濾管中,，吹打使其混合,。d）
（5）將過濾管放入培養(yǎng)箱中，37℃培養(yǎng)10分鐘,。
（6）將100 μl WS buffer加入到過濾管中,，8,000-10,000 g離心10分鐘，b）除去濾液,。
（7）將200 μl WS buffer加入到過濾管中,，8,000-10,000 g離心10分鐘，b）重復(fù)該步驟一次,。
（8）將200 μl WS buffer加入到過濾管中吹打10-15次來回收標(biāo)記產(chǎn)物,。e）將該溶液轉(zhuǎn)移到0.5 ml試管中，在0-5℃下保存,。
  a）樣品溶液的體積不應(yīng)超過100 μl,。如果抗體濃度低于1 mg/ml，重復(fù)步驟1和2直至總的IgG聚積量達到100 μg,。如果聚積過程中濾液的體積超過400 μl,，則在進行后續(xù)的離心操作前應(yīng)除去濾液。
  b）如果溶液在離心后仍然殘留在膜上,，可以再離心5分鐘或者適當(dāng)增加轉(zhuǎn)速,。
  c）NH2-reactive biotin在管子的底部，向管底加入10 μl DMSO,，吹打數(shù)次使其溶解,。
  d）如果IgG的量為200 μg，在步驟4時加入所有的NH2-reactive biotin溶液,。
  e）并不一定要使用WS buffer來回收標(biāo)記產(chǎn)物,，可以選擇任何適合于該實驗的緩沖液來替代。

注意事項

用該試劑盒標(biāo)記的蛋白質(zhì)的分子量要>50,000,。
在標(biāo)記過程中,，IgG或者biotin-IgG標(biāo)記物始終在Filtration tube的濾膜上。
如果IgG溶液中含有分子量>10,000的其他蛋白質(zhì),，如BSA或明膠時,，在使用該試劑盒標(biāo)記前，先要純化IgG溶液,。IgG溶液能夠用IgG Purification Kits（不包含于本試劑盒中）來純化,。
如果IgG溶液含有小的不溶物,，離心后取上清液來進行標(biāo)記,。
如果長時間不使用,，建議您把試劑盒中的標(biāo)記試劑NH2-reactive biotin放在-20℃冰箱中保存，不需要充氮氣,，可以更好地保持標(biāo)記試劑的活性,，但請不要把其它試劑和過濾管放到-20℃冰箱中，仍請放在0-5℃冰箱中保存,。

品名：Dojindo Kit-NH2生物素標(biāo)記試劑盒
貨號：LK03
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