
![]() | 重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 |
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PeproTech公司的重組細(xì)胞因子
閱讀:1888發(fā)布時(shí)間:2014-9-5
PeproTech公司的重組細(xì)胞因子產(chǎn)品經(jīng)過了十分嚴(yán)格的生產(chǎn),、純化及質(zhì)檢過程,,保證其在投放市場(chǎng)之前,,達(dá)到如下要求:
1. 真實(shí)性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過N末端氨基酸序列分析;必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測(cè)其真實(shí)性,。
2. 純度:應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度,。
3. 生物活性:進(jìn)行相應(yīng)的體外(in vitro)或體內(nèi)(in vivo)活性檢測(cè)。
4. 蛋白含量:通過紫外光譜分析,,SDS-PAGE電泳檢測(cè);必要時(shí)應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液,。
5. 內(nèi)毒素:kinetic LAL法檢測(cè)內(nèi)毒素,。
6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過濾除菌處理。
產(chǎn)品隨附的說明書上載有產(chǎn)品的各項(xiàng)相關(guān)信息,。請(qǐng)仔細(xì)閱讀這些信息,,了解其配制和貯存提示。如果在閱讀說明書后仍需更多信息,,請(qǐng)查看以下常見問題解答,,或致電我們的技術(shù)服務(wù)部門。
重組細(xì)胞因子的凍干狀態(tài)
與市場(chǎng)上已有的其他蛋白產(chǎn)品不同,,PeproTech細(xì)胞因子不含carrier protein或其他添加物(如BSA,、HAS、蔗糖等),,而是以低鹽的形式做凍干處理,,因此微量的細(xì)胞因子在凍干過程中會(huì)沉積于管內(nèi),形成很薄或不可見的蛋白層,。PeproTech的質(zhì)控過程確保每管裝有非常準(zhǔn)確量的蛋白產(chǎn)品,。所以我們建議在收到試劑后,務(wù)必于開蓋前先離心20-30秒,,使可能附于管蓋或管壁的蛋白成分聚集于管低(此時(shí)能否見到白色沉淀均屬正?,F(xiàn)象)。
重組細(xì)胞因子活性單位(units)的換算
各公司在開發(fā)出重組細(xì)胞因子并檢測(cè)其活性后,,通常會(huì)以ED50(半數(shù)有效濃度)或units(活性單位)來標(biāo)識(shí)其細(xì)胞因子的生物活性,。因此1mg細(xì)胞因子中所含的活性單位(units)可以理解為將1mg/ml細(xì)胞因子原液稀釋成ED50的稀釋倍數(shù),以下是二者的換算公式:重組細(xì)胞因子的穩(wěn)定性
除非產(chǎn)品說明書上另有特別說明,,否則所有PeproTech蛋白產(chǎn)品都為凍干粉形式,,在室溫下也能保持很好的穩(wěn)定性。但是,,我們推薦凍干產(chǎn)品保存于-20℃,。大多數(shù)凍干產(chǎn)品經(jīng)溶解和稀釋后,可短時(shí)間保存于4℃,;若要進(jìn)行較長(zhǎng)時(shí)間保存,,我們建議稀釋到工作液濃度并加入一定的carrier protein(如0.1% BSA),,然后分裝保存于-20℃。請(qǐng)注意每一次凍融過程都會(huì)造成蛋白的部分變性,,應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
重組細(xì)胞因子的交叉活性
除了少數(shù)例外,大多數(shù)人類細(xì)胞因子對(duì)小鼠細(xì)胞都有活性,。許多小鼠細(xì)胞因子對(duì)人類細(xì)胞也有活力表現(xiàn),,但是與相應(yīng)的人類細(xì)胞因子相比比活力較低。一些人類的細(xì)胞因子如IL-7在小鼠細(xì)胞中甚至表現(xiàn)出比相應(yīng)的小鼠細(xì)胞因子更高的比活力,。而干擾素,、GM-CSF、IL-3 和IL-4 是物種特異性的,,對(duì)于非人類細(xì)胞幾乎沒有活性,。相反,成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (FGFs) 和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 (neurotrophins) 是高度保守的,,在其它的動(dòng)物物種細(xì)胞中也能表現(xiàn)很好的活性,。
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