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Paxgene血液RNA管使用方法
閱讀:1177發(fā)布時間:2024-2-4
PAXgene血液RNA管旨在立即穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)RNA,從而產(chǎn)生準(zhǔn)確且可重復(fù)的基因表達(dá)數(shù)據(jù),。PAXgene血液RNA管含有一種專有試劑,,可在采集后立即穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)RNA。細(xì)胞內(nèi)RNA在室溫下穩(wěn)定長達(dá)三天或在2-8°C下穩(wěn)定長達(dá)五天,。PAXgene試管可以在-20°C至-70°C的溫度下冷凍,,以便長期儲存。
BD 762165 Paxgene血液RNA管使用方法:
1.將0.2-1.5mL新鮮或解凍后的抗凝全血加入到1.5mL塑料離心管中,。
2.12,,000rpm室溫離心3分鐘,棄上清(血漿),。如果此時血液細(xì)胞沉淀體積大于0.2mL,,則需要減少血液的使用量,具體減少量需根據(jù)具體情況決定,因為各個個體(尤其是患者)血液中白細(xì)胞數(shù)目差別很大,。
3.將1mL溶液A加入到血液細(xì)胞沉淀中,,用移液槍吹打沉淀使細(xì)胞裂解,。
4.將0.3mL的溶液B加入到離心管中,,劇烈震蕩30秒。
5.和0.2mL氯仿加入到離心管中,,劇烈震蕩30秒,。
6.12,000rpm室溫離心3-5分鐘,,將上清液(為無色或淺紅色,,約0.5-0.9mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈離心管中。為防止污染,,建議留100uL左右的上清液,。下層有機(jī)相一般呈深紅色,中間層為白色,,含有DNA,,蛋白質(zhì)和其他細(xì)胞破碎物,避免觸及或吸取,。
7.在上清液中加入0.5mL的溶液C和0.2mL的自備氯仿,,用手上下顛倒或振蕩器振蕩30秒混勻,此時溶液呈均勻的乳濁狀,。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來,。
8.室溫12,000rpm離心3分鐘,,兩相間將有白色膜狀物(蛋白質(zhì))形成,。
9.將上清液(約1mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中,避免觸及或吸取有機(jī)相及其上面的白色膜狀物,。
10.在上清液中加入0.5倍體積的溶液D,,用手上下顛倒或振蕩器振蕩30秒混勻。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來,。
BD全血RNA管762165具有下列特點:
◆ 體外診斷使用,具有CE-IVD標(biāo)志,符合歐盟98/79/EC 指令
◆ 整合的系統(tǒng),用于采集,、穩(wěn)定和純化胞內(nèi)RNA
◆ 提供在分析工作進(jìn)行之前的樣本標(biāo)準(zhǔn)化處理
◆ 在 18~25℃下,RNA穩(wěn)定可長達(dá)3天
◆ 在-20℃ 或 -70℃條件下至少穩(wěn)定50個月
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