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怎樣避免細胞污染
閱讀：1057發(fā)布時間：2022-6-27
細胞是構(gòu)成人體結(jié)構(gòu)和功能的最基本單位,，人體就是由大量的不同類型的細胞組成的,，在不同的組織器官,，含有不同的細胞，分別具有不同的結(jié)構(gòu),，執(zhí)行不同的功能,。比如血液中有三種血細胞，分別是紅細胞白細胞和血小板,，紅細胞具有運輸氧氣和二氧化碳的功能,，白細胞在人體的免疫功能中發(fā)揮著重要作用，血小板是人體負責止血的血細胞,。另外,，人體還有多種其他類型的細胞，分別執(zhí)行著不同的功能,。
怎樣避免細胞污染：
1.實驗進行前,，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,，并開啟超凈臺風機運轉(zhuǎn)5-10min再開始實驗操作,。
2.實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi)；實驗用品用完應移出超凈臺,，以利于空氣的流通,；實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。
3.每次操作只處理一種細胞,；即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,，避免細胞間的交叉污染,。
4.操作時小心取用無菌的物品，避免污染,。勿碰觸吸管尖頭,，不小心碰觸后應立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作,，容器打開后,，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋,。
5.CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,，應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁,、隔板,、水盤2-3次，用雙蒸水清洗,，再用酒精棉球擦拭一遍,，最后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水（應每周更換）,，待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度,、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞,。
6.定期清洗或更換超凈臺過濾膜,、預濾網(wǎng)。
注意事項：
1,、 DMSO配制的時候會放熱,，一定要等凍存液冷卻后使用，避免灼傷細胞,；
2,、 細胞離心后盡量吸干凈上清液，減少培養(yǎng)基殘留,，避免稀釋凍存液,；
3、 不建議手動梯度降溫,，溫度不穩(wěn)定,，容易降低存活率；
4,、 注意程序降溫盒內(nèi)異丙醇的量必須高于低刻度線,；凍存5次后異丙醇需要更換一次，以免影響凍存效果；程序降溫盒需恢復到室溫以后才能繼續(xù)使用,，不能從冰箱拿出來直接使用,；
5、 細胞懸液加入凍存液以后盡量短時間的在常溫放置,，DMSO常溫下對細胞損傷大,，分裝完成后立即轉(zhuǎn)入程序降溫盒放到-80度冰箱，不需要放4度,；
6,、 -80度凍存過夜后可以轉(zhuǎn)入液氮長期保存，轉(zhuǎn)入液氮的過程需要對凍存盒進行保冷,，不要長時間在常溫暴露,，避免凍存管融化；
7,、 若沒有液氮罐,，存放在-80度的時候一定要放靠里面的位置，避免開關(guān)冰箱導致溫度不穩(wěn)定,。
8,、 細胞凍存后應取出一管復蘇，檢測細胞的存活率,。理論上細胞可在液氮內(nèi)長期保存,，為穩(wěn)妥起見可在細
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